内外菌落总数测定基本致检处理、稀释、倾注平皿计数报告何明显同某些具体要求面稍差别家品稀释倾注培养进吸管内液体流速稀释液振荡幅度、间数及放置间等均作比较具体规定
检验参见：
GB4789.2-94 《华民共家标准 食品卫微物检验 菌落总数测定》
SN0168-92 《华民共进口商品检验行业标准 口食品菌落计数》
文章链接：制药机械设备网1．操作：菌操作取检25g（或25ml）放于225mL灭菌理盐水或其稀释液灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适数量玻璃珠）或灭菌乳钵内经充振要或研磨制1：10均匀稀释液
固体检加入稀释液置灭菌均质器8000~10000r/min速度处理1min制1：10均匀稀释液
用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml沿管壁徐徐注入含9ml灭菌理盐水或其稀释液试管内振摇试管混合均匀制1：100稀释液
另取1ml灭菌吸管按项操作顺序制10倍递增稀释液每递增稀释即换用1支1ml灭菌吸管
2．菌操作：操作必须菌操作概念所用玻璃器皿必须完全灭菌残留细菌或抑菌物质所用剪刀、镊等器具必须进行消毒处理品包装应用75%乙醇包装口处擦拭取
操作应超净工作台或经消毒处理菌室进行琼脂平板工作台暴露15钟每平板超15菌落
3．采代表性：系固体品取应集点宜采几部位固体品必须经均质或研磨液体品须经振摇获均匀稀释液
4．品稀释误差：减少品稀释误差连续递稀释每稀释液应充振摇使其均匀同每稀释度应更换支吸管
进行连续稀释应吸管内液体沿管壁流入勿使吸管尖端伸入稀释液内免吸管外部粘附检液溶于其内
减少稀释误差SN标准采用取10mL稀释液注入90mL缓冲液
5．稀释液：品稀释液主要灭菌理盐水采用磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水）者食品已受损伤细菌细胞定保护作用含盐量较高食品（酱油）进行稀释采用灭菌蒸馏水
（二）倾注培养
1．操作：根据标准要求或污染情况估计选择2~3适宜稀释度别制10倍递增稀释同吸取该稀释度吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿每稀释度做两平皿
凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml并转平皿混合均匀同营养琼脂培养基倾入加1ml稀释液（含品）灭菌平皿内作空白照
待琼脂凝固翻转平板置36±1℃温箱内培养48±2h取计算平板内菌落数目乘稀释倍数即每克（每毫升）品所含菌落总数
2．倾注用培养基应46℃水浴内保温温度高影响细菌低琼脂易于凝能与菌液充混匀水浴应皮肤受较热烫宜
倾注培养基量规定12~20ml等般15ml较适宜平板厚影响观察太薄易于干裂倾注培基底部沉淀物应底部弃免与菌落混淆影响计数观察
3．使菌落能平板均匀布检液加入平皿应尽快倾注培养基并旋转混匀反两向旋转检始稀释倾注平皿所用间宜超20min防止细菌所死亡或繁殖
4．培养温度般37℃（水产品培养温度由于其环境水温较低故采用30℃）培养间般48h些要求24h培养即计数培养箱应保持定湿度琼脂平板培养48h培养基失重应超15％
5．避免食品微颗粒或培基杂质与细菌菌落发混淆易辨同作稀释液与琼脂培基混合平板经培养于4℃环境放置便计数作照观察
某些场合防止食品颗粒与菌落混淆清营养琼脂加入氯化三苯四氮唑（TTC）培养菌落呈红色易于别
（三）计数报告
1．操作：培养间计数每平板菌落数用肉眼观察必要用放镜检查防遗漏记各平板菌落总数求同稀释度各平板平均菌落数计算处原始品每克（或每ml）菌落数进行报告
2．达规定培养间应立即计数能立即计数应平板放置于0－4℃超24h
3．计数应选取菌落数30~300间平板（SN标准要求25~250菌落）若二稀释度均30~300间按家标准要求应二者比值决定比值于或等于2取平均数比值于2则其较数字（规定考虑其比值均平均数报告）
4．若所稀释度均计数区间均于300则取高稀释度平均菌落数乘稀释倍数报告均于30则低稀释度平均菌落数乘稀释倍数报告菌落数于300于30均30~300间则应接近300或30平均菌落数乘稀释倍数报告所稀释度均菌落则应按于1乘低稀释倍数报告规定述几种情况计算菌落数按估算值报告
5．同稀释度菌落数应与稀释倍数反比（同稀释度二平板菌落数应基本接近）即稀释倍数愈高菌落数愈少稀释倍数愈低菌落数愈现逆反现象则应视检验差错（食品能现逆反现象酸性饮料等）应作检计数报告依据
6．平板链状菌落呈链状菌落间任何明显界限则应作菌落计存几条同源链则每条链均应按菌落计算要链每菌落计数片状菌落该平板般宜采用片状菌落平板半另半布均匀则半平板菌落数乘2代表全平板菌落数
7．计数平板内菌落数（即所稀释度均于300）布均匀取平板半或1/4计数再乘相应稀释倍数作该平板菌落数