二、细胞实验室根据功能分区
(1)划分为洁净区和非洁净区 。
(2)洁净区包含:更衣区;缓冲区;细胞制备区;细胞培养区;配液区;微生物检测区 。
(3)非洁净区包含:样本接收区;免疫检测区;细胞生物学检测区;理化检测区;物料存放区;清洗消毒区;气体储存区;信息中心区;细胞储存区;档案存放区 。
三、细胞培养实验室工作内容
1.无菌操作
2.孵育
3.制备
4.清洗
5.消毒灭菌处理
6.储藏
四、细胞室设计基本设备
(1)显微镜:倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一 , 便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等 。
(2)培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样 , 需要在恒定的温度下生存 , 大多数情况下 , 最适温度是37℃ , 温差变化一般不应超过±0.5℃ , 细胞在温度升高2℃时 , 持续数小时即不能耐受 , 40℃以上将很快死亡 。因此需要有能控制温度的培养箱 , 如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO2培养箱 。
(3)干燥箱:用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用 , 玻璃器皿等须干热消毒 。干热消毒时 , 电热干燥箱升温较高 , 一般需达到160℃以上 。通常使用鼓风式电热干燥箱 。其优点是温度均匀、效果较好 , 缺点是升温过程较慢 。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始 , 至100℃时 , 停止鼓风 , 应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦 , 烧焦的碎屑可影响细胞的生长 。消毒后 , 不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏 , 应等候温度自然下降至100℃以下方可开门 。
thermo 3111 细胞培养箱怎么开机3111细胞培养箱使用注意事项:
1.把减压阀出气压力调到 0.06Mpa,最大不能超过 0.1Mpa 。
2.按 Mode 键选 Set 是设定你所需要控制的值 , 按左右箭头选择设定项 , TEMP 如 是温度设定;OTEMP 是超温报警设定;CO2 是二氧化碳设定 , 然后按上下箭 头设定新的数值 , 最后按 ENTER 键确认保存 。3. 如果报警显示 Add Water,表示设备里的水套缺水,请用蒸馏水并使用附件提 供的漏斗一直加到设备不报警为止 。4.如果显示 Replace HEPA, 只是提醒您需要更换箱内高效过滤器,不是表示设 备有问题,如果您不想更换可以照常使用 。5. 如果不用二氧化碳 , 请把二氧化碳设定到零点 , 否则过 15 分钟后会报警 。
6.培养箱在使用时 , 室内温度要保持在 28℃以下 , 特别是夏天需要 24 小时开空调 , 否则设备会超温报警 。
7.培氧箱在使用时 , 需定期检查增湿盘内是否缺水 , 如果缺水请务必加蒸馏水 。8.可用 70%酒精或中性不含氯的消毒剂给培养葙培养室作定期的常规消 毒 。9.培养箱如果长期不使用 , 请切断电源 , 把增湿盘拿出来并且把箱内擦干净 。
细胞培养箱里面灌的水必须是无菌的吗培养箱应放置无菌室,水中应加适量的叠氮钠(防腐)或者硫酸铜,注意空气消毒.
消毒培养箱的常用方法有两种:
把细胞移出 , 记住拧紧瓶盖 , 通常放在超净台内 , 室温一两个小时 , 问题不大 。如培养室有空调 , 也可将空调打开 。然后先用75%酒精棉球擦拭培养箱内壁 , 注意不要漏掉任何一个角落 。擦拭两遍后用一蒸水或二蒸水清洗内壁 , 可多清洗几遍 。最后用消过毒的棉球或75%酒精棉球把内壁再擦拭一遍即可 。整个操作没有
必要在无菌条件下 。最后可在培养箱的水里加上亚甲基蓝 , 混匀即可 。亚甲基蓝溶液可起到一定的抑菌杀菌作用 。待培养箱内酒精几乎挥发完时 , 将细胞放入培养箱中 。
还有一种办法就是直接用蒸馏水清洗完 , 然后再用紫外灯照(最好是那种培养箱里就带有紫外灯的 , 就方便多了 。)
通常培养箱是需要定期清洗的 , 我们实验室是1-2月清洗一次 , 当然这要根据细胞养的多少和培养箱使用的频繁程度来决定的 。
细胞培养过程中污染是如何发生的?要怎么有效避免培养箱污染呢?1、取放细胞时引起的污染
细胞培养过程中 , 取放细胞是基本的操作 , 培养箱开关门的瞬间 , 环境中的微生物或多或少会进入培养箱中 , 而且内外温差导致内门冷凝水的产生 , 易吸附微生物 , 都是造成培养箱污染的风险因素 。
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