生科梁永恒团队找到细胞“垃圾清运打包”的工作模式( 二 )

考虑到Vps21/Rab5本身不具有对细胞内膜性细胞器封口的能力 , 但Vps21/Rab5可以调控ESCRT复合体 , 一种对细胞内多种膜性细胞器具有封口或修复能力的“智能万能胶” 。 该课题组尝试探讨Vps21/Rab5是否通过ESCRT对自噬前体进行封口 。 他们通过荧光显微镜和电镜观察 , 生化

实验检测

等发现ESCRT复合体主要亚基Snf7和Vps4缺失也产生与Vps21缺失(vps21?)类似的自噬缺陷表型 , 即产生未闭合的自噬前体 。 并通过实验证实Snf7和Vps4确实可以对来自各自相应突变体的自噬前体进行封口 , 首次证实了ESCRT复合体可直接调控自噬前体的闭合 。

为了弄清楚为什么Vps21缺失后自噬前体也不能闭合 , 该课题组进一步的实验发现 , Snf7在vps21?菌株中无法与自噬前体上的自噬蛋白Atg17互作 , 从而“迷路”无法找到自噬前体的位置 , 因而ESCRT复合体无法在自噬前体上

行使

封口功能 。 他们通过采用一种纳米捕获技术(NanoTrap) , 人为使vps21?菌株中的Snf7与Atg17进行共定位后 , 惊喜地发现vps21?菌株中的自噬缺陷表型得到了恢复 。 这些结果说明 , Vps21至少通过控制Snf7与Atg17的互作将ESCRT复合体招募到自噬前体上