学会这 5 步,轻松搞定 transwell 实验( 五 )

2. 消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,(用 PBS 洗 1-2 遍,这一步很必要,否则细胞表面覆有血清培养基,细胞没有迁移侵袭的动力),用无血清培养基重悬。

 

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接种细胞

1. 细胞悬液 200μl 加入 Transwell 小室(肿瘤细胞数目需要摸浓度,从 2 万,5 万,10 万)。

2. 24 孔板下室一般加入 600μl 含 15%FBS 的培养基,特别注意的是,下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失。在种板的时候要特别留心,一旦出现气泡,要将小室提起,去除气泡,再将小室放进培养板。