恰当的稀释度是成功地统计菌落的关键 ， 一般来讲 ， 每个培养皿中有20个以内的菌落适于计数 。
为保证结果的可信度 ， 在同一稀释度下 ， 至少要对3个平板进行重复计数 ， 求出平均值 。
样品中细菌数量的计算方法是：平均菌落数涂布的稀释液体积稀释倍数（3）利用鉴别培养基确定细菌种类：在细菌分解尿素的化学反应中 ， 细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨 ， 氨会使培养基 。

13、的碱性增强 ， pH升高。
因此 ， 我们可以通过检测培养基pH变化来判断该化学反应是否发生 。
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 ， 培养某种细菌后 ， 如果pH升高 ， 指示剂将变红 ， 说明该细菌能够分解尿素 。
3思考题：（1）农作物不能直接吸收利用尿素 ， 但尿素却是农业生产上的重要氮肥 。
农作物如何利用尿素中的氮？（2）怎样从杂菌中分离得到能利用尿素的细菌?（3）怎样确定单位体积稀释液中细菌的数量？（4）如何确定培养基中生长的细菌能够分解尿素？【实验目的】1使用专一的培养基（含尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌） 。
2使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应 。
3使用稀释平板法统计菌落数【材料用具】尿素固体 。

14、培养基和LB固体培养基、10-2和10-3土壤稀释液70%酒精及酒精棉试管架、有塞试管、广口瓶、镊子、玻璃刮刀、酒精灯、移液器、培养皿、三角瓶【操作流程】制备培养基制备细菌悬液涂布法分离细菌统计菌落数【实验步骤】 请在实验前预习并填写 。
1用镊子夹取酒精棉 ， 将手及实验台擦拭干净 ， 待 后点燃酒精灯 。
2制备培养基将两个三角瓶中已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基 ， 在 左右时 ， 在 旁分别倒入两个培养皿中 ， 在水平的超净台上摇匀 ，至凝固 。
3制备细菌悬液将1g土样加入盛有 ml无菌水的三角瓶中 ， 振荡 min ， 即成 稀释液 。
吸取上清液 ml ， 转移至盛有 mL的无菌水的无菌大试管中 ， 依此方法制备出 稀释液 ，。

15、摇匀 ， 放在试管架上 。
4.用涂布法分离细菌取样时 ， 尽量只取 ___。
并按照稀释液浓度由低到高的顺序分别吸取 ml土壤稀释液加到 培养基和 培养基的培养皿中（不必更换移液管） ， 再将保存在 酒精中的 放在 上 ， 待刮刀上火焰熄灭 ， 在 旁打开培养皿 ， 将菌落涂布在 上 。
5.细菌的计数 将涂布好的培养皿顶盖上写明实验内容、接种人姓名和接种日期后倒置 ， 放在37温度下培养 h 。
观察并记录菌落数 。
【实验记录和数据处理】1有菌落的尿素培养基颜色变化是：由 色变成 色 。
2培养基中菌落数目的统计和计算：稀释度培养基 10-2稀释度10-3稀释度LB培养基菌落数样品各种细菌的数目尿素培养基菌落数样品中以尿素为氮源的细菌 。

16、的数目【实验结论】该样品中 （含有/不含有）能分解尿素的细菌 ， 含量约为 个/g【创新空间】你对于本实验的过程和结果有何疑问？对于实验步骤有何改进建议？请将它们写在这里 ， 我们将共同提高！【实验考核】 检查人：项目实验预习实验操作实验安全实验清理实验结果总评成绩其它【课后练习】1下列氮肥能被植物直接吸收的是( )硝酸盐 尿素 磷酸二氢氨 氨A B C D 2土壤中分解尿素的微生物所需氮源为( )A硝酸 B氨 C尿素 D蛋白胨3将某种细菌接种到彻底灭菌的固体培养基上 ， 经过一段时间后能得到（ ）A无一定形态的群体 B菌丝 C单个细菌 D菌落4以下叙述中对尿素培养基进行灭菌的不正确操作是( )A对配制好 。

17、的尿素培养基进行高压蒸汽灭菌 B用内置滤膜的玻璃漏斗过滤尿素溶液C对除尿素以外的培养基成份进行高压蒸汽灭菌D在60时 ， 把灭菌后的尿素溶液和其它培养基成份混合5从土壤中分离能分解尿素的细菌 ， 可以利用选择培养基 ， 其成分中一定有尿素 有机氮化合物 无机盐 有机碳化合物 水 无机的碳化合物A B C D 6用来判断选择培养基是否起到了选择作用 ， 需要设置的对照是( )A未接种的选择培养基 B未接种的LB培养基C接种了的LB培养基 D接种了的选择培养基7利用稀释平板法进行菌落计数时 ， 使用的培养基种类应该是什么？为保证计数准确 ， 形成一个菌落的最初细菌数应该是多少？（ ）A液体培养基、一个细菌 B液体培养基、 。

【实验|实验1大肠杆菌的培养和分离】18、许多细菌 C固体培养基、一个细菌 D固体培养基、许多细菌 8利用稀释平板法进行菌落计数时 ， 培养皿中长满了大小不一的菌落 ， 数量有43个 ， 以下分析中不正确的是（ ）A样品稀释度不足时会出现这种情况 B接种的菌液中有43个细菌 C某些菌落是由多个细菌繁殖形成的 D某些菌落是由单个细菌繁殖形成的9用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数 ， 在对应稀释倍数为10-3的培养基中 ， 得到以下几种统计结果 ， 正确的是( )A涂布了2个平板 ， 统计的菌落总数是36 ， 记录36B涂布了2个平板 ， 统计的菌落数是13和17 ， 取平均值15C涂布了3个平板 ， 统计的菌落数分别是2、14和16 ， 取平均值11D涂布了3个平板 ， 统计的菌落数分别是15、13和17 ， 取平均值 。

来源：(未知)

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标题：实验|实验1大肠杆菌的培养和分离( 三 )