按关键词阅读: 方法 分析 凝血
7、在凝固过程中产生的纤维蛋白丝不断缠绕于钢珠上 , 使 液体反而逐渐变清 , 吸光度值逐渐降低 。
该方法重复性好 , 监测范围大(可以监测结果超 高和低纤维蛋白原的各种异常血浆) , 但是由于仍以监测吸光度变化为依据 , 所以无法从 根本上解决溶血、高脂血症或乳糜微粒、浑浊等干扰物对检测的影响 。
光学法凝血测试的优点在于灵敏度高、仪器结构简单、易于自动化 , 缺点是样品的光学异 常、测试杯的光洁度、加样中的气泡等都会成为测量的干扰因素 。
针对光学法血凝仪遇到 有较高初始浊度的样品就无能为力的弱点 , 不同型号的光学法血凝仪采取了各种不同的措 施 。
例如 , 有的用本底扣除的百分浊度法 , 这对中、低初始浊度有补偿作用 , 而不能解决 高浊度样 。
8、品的测试;又如 , 有的利用一阶微分的峰值作为凝固终点 , 但微分处理会引起重 复性变差 。
3. 双磁路磁珠法:早期的是在检测杯中放一粒磁珠 , 与杯外一根铁磁金属杆紧贴呈直线状 , 标本凝固后 , 由 于纤维蛋白的形成 , 使磁珠移位而偏离金属杆 , 仪器据此检测岀凝固终点 。
这类仪器也可 称为平面磁珠法 。
早期的平面磁珠法虽能有效克服光学法中样品本底干扰的问题 , 但也存 在着灵敏度低等问题 。
现代磁珠法在八十年代末提出、九十年代初商品化 。
现代磁珠法曾形象地称为摆动磁珠法 , 不过双磁路磁珠法的名称更为确切 。
双磁路磁珠法的测试原理(图3 )如下:测试杯两侧的有一组驱动线圈 , 它们产生恒定的交替电磁场 , 使测试杯内特制的去磁小钢珠保持等幅 。
9、振荡运动 。
凝血激活剂加入后 , 随着 纤维蛋白的产生增多 , 血浆的粘稠度增加 , 小钢珠的运动振幅逐渐减弱 , 仪器根据另一组 测量线圈感应到小钢珠运动的变化 , 当运动幅度衰减到50%时确定凝固终点 。
双磁路磁珠法进行凝血测试 , 完全不受溶血、黄疸及高血脂症的影响 , 甚至加样中产生气 泡也不会影响测试结果 。
光学法血凝仪的试剂用量只有手工测量的一半 。
而磁珠法的试剂用量只有光学法的一半! 这是因为在比浊测定过程中 , 激发光束必须打在测试杯的中间 , 所以要有足够的试剂量 。
在双磁路磁珠法测量中 , 钢珠在测试杯的底部运动 , 因此试剂只要覆盖钢珠运动即可 。
双磁路磁珠法中的测试杯和钢珠都是专利技术 , 有特殊要求 。
测试杯底部的弧线设计与磁 。
10、 路相关 , 直接影响测试灵敏度 。
小钢珠经过多道工艺特殊处理 , 完全去掉磁性 。
在使用过 程中 , 加珠器应远离磁场 , 避免钢珠磁化 。
为了保证测量的正确性 , 钢珠应当一次性使用 。
图3双磁路磁珠法示意图血凝仪的测量过程中 , 充分搅拌至关重要 , 这对于凝血过程的描述和凝固终点的判断都会 有很大帮助 , CV会有很大改进 。
在仪器中常用磁珠搅拌或离心方式来达到目的 。
现在有相 当一部分光学式半自动血凝仪采用磁珠搅拌 。
二、底物显色法(生物化学法)底物显色法通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的 , 该方法又可 称为生物化学法 。
检测通道由一个卤素灯为检测光源 , 波长一般为405nm 。
探测器与光源呈直线 , 与比色计相仿 。
凝 。
11、血仪使用产色底物检测血栓与止血指标的原理是:通过人工合成与天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序并还有特定作用位点的小肽 , 并将可水解产色的化学基因与作用位点的氨基酸相连 。
测定时由于凝血因子具有蛋白不解酶的活性 , 它不仅作用于天然蛋白质 肽链 , 也能作用于人工合成的肽段底物 , 从而释放岀产色基因 , 使溶液呈色 。
产生颜色的 深浅与凝血因子活性成比例关系 , 故可进行精确的定量 。
目前人工合成的多肽底物有几十 种 , 而最常用的是对硝基苯胺( PNA),呈黄色 , 可用 405mm波长进行测定 。
底物显色法灵敏度高、精密度好 , 而且易于自动化 , 为血栓/止血检测开辟了新途径 。
底物显色法通常使用以下三种形式:a)先将被检血浆中的 。
12、某种酶加以激活 , 然后由此活化的凝血因子对人工合成的底物进行水解而呈色 , 如纤溶酶原 , 蛋白C测定等 。
b)向被检血浆中加入过量的有关试剂 , 以中和相应的抗凝因子 , 然后测定其残余的酶活性 , 如AT-活性测定 , a2抗纤溶酶测定 , 肝素测定等 。
稿源:(未知)
【傻大方】网址:/a/2021/0814/0023697653.html
标题:凝血|凝血分析方法( 二 )