1)高灵敏度:GelRed 和 GelGreen 是目前市场中最灵敏的凝胶核酸染料之一;
2)稳定性极好:可以使用微波炉加热,可以在室温下保存;
3)更安全:艾姆斯氏试验结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB);
4)广泛的适应性:适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色;
5)染色过程简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗;
6)对 DNA 和 RNA 的迁移影响小:对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I?;
7)与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时,GelRed 可以完美的替代EB;使用 254nm 激发的 UV 凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时,GelGreen 足以替代任意一种 SYB染料 。但该染料会使小片段DNA迁移慢一些(与EB相比).
3、绿色荧光核酸染料
绿色荧光核酸染料对于大片段DNA的染色效果良好,但是在对于500bp以下的片段效果不是很好,还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭,一般5-10min条带就会消失 。另外绿色荧光核酸染料不适用于胶回收 。
4、SYBR Green 和SYBR Gold
稳定性差,也有毒性 。它属于花箐素类核酸染料,花箐类染料不是无毒的,而只是低毒的,电泳级别的是经过修饰的,修饰有三种:1.加入卤素或氰基 。2.插入环羟基 。3.加入稳定剂 。SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗 。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍 。SYBR Green I 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低 。SYBR Green和SYBR Gold相对于EB的稳定性要差很多 。SYBR系列的染料也能进入细胞染色线粒体以及核内的DNA,从而产生危害 。SYBR Green I已被证实在紫外光下将会产生强诱变能力,使DNA或其他物质发生突变 。
几种核酸染料的比较
染料安全性稳定性灵敏优点缺点
EB--+++廉价强诱变剂
Gel Green++++安全价格高
绿色荧光核酸染料--+大片段染色良好易淬灭
SYBR Green--++灵敏稳定性差
核酸染料(Nucleic acid dye)DNA染料:碘化丙啶(PI)、DAPI
核酸染料加多了会影响电泳结果吗会 。核酸染色应用在许多DNA检测相关的技术领域,染色剂结合DNA会造成电泳迟滞,加多了也会影响电泳结果 。核酸染料是一种灵敏、稳定和相对安全的荧光核酸染色试剂,是生物实验中不可或缺的一分子 。
核酸染料加入后不溶解核酸染料加入后不溶解是因为GelRed核酸染料是一种具有凝胶染色特性,并被设计为替换高毒性染色剂-溴化乙锭(EB)的红色荧光核酸染色剂 。
GelRed核酸染料既可用于前染(precast gel staining),也可用于后染(post gel staining) 。通常后染比前染能够获得更灵敏的特性,并能排除染色剂在电泳过程中对核酸条带分离造成任何影响的可能性 。然而,前染较后染更为简单、经济,因为前染不需要额外的着色过程,并且燃料用量更少 。因此,假如灵敏度和条带清晰度不成问题,前染则是首选 。我们强烈建议您尝试两种染色方法,以便根据您的需要选择最佳的染色方法 。
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