分离度受柱效、选择因子和容量因子三个参数的控制 。
柱效:是指色谱柱保留某一化合物而不使其扩散的能力 。柱效能是一支色谱柱得到窄谱带和改善分离的相对能力 。
选择性因子:又称分配系数比、分离因子 。色谱用语,相邻两组分的分配系数或容量因子之比 。
容量因子:指在一定温度和压力下,组分在两相(固定相和流动相)分配达平衡时,分配在固定相和流动相中的质量比 。
气相色谱分析中,影响分离度的因素有哪些影响气相色谱分离度的因素有:
1、色谱长度
色谱长度与分离度通常成正比 。色谱柱越长,组分之间分辩效果越好,但色谱柱越长压降越大,而输入的压力是有限的 。色谱柱过长会增大进出口压力比,相反会降低分离度 。通常采用的柱长2m~4m,内径2mm,毛细管柱长度可达20m~150m,内径为0.2mm 。
2、色谱柱填料颗粒大小
填料的粒子越细,由于表面积增加,分辩效果越好,分离度就越高 。但是颗粒极细时可能会增大柱压降,也会起反作用 。一般采用惰性、多孔的固体颗粒 。多由硅藻土或玻璃珠制成,分析不同极性的微生物化合物,为了获得最适的分离条件,要求有不同固定相的载体 。
3、柱温
气体在液体中的溶解度或在固体表面的吸附程度都随温度增高而降低,在气液色谱分析中,当超过一定温度时,静态的液体通常会从色谱柱中挥发掉,所以选择柱温时应考虑到样品的沸点 。一般是略低于样品沸点的平均值 。
4、载气种类
常用的载气有 氮气、氢气等 。其中氢气、氦气的分子量较小,有利于提高分析速度,但浓度较高的介质易在其间形成扩散,影响分离度,所以在实际测量中氢气、氦气一般都用在介质浓度较低的区域并提高其流速,减少扩散的影响 。
5、载气流速
介质在固定相上的滞留时间,主要取决于介质自身的特性(挥发性,极性等)和载气的流速 。所以流速快慢直接影响分离度 。
参考资料来源:百度百科-气相色谱层析
色谱的分离度是怎么回事,什么因素会影响他,请举例说明,又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用R表示.R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比.
resolution,R
相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值.也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度.R越大,表明相邻两组分分离越好.一般说当R<1时,两峰有部分重叠;当R=1.0时,分离度可达98%;当R=1.5时,分离度可达99.7%.通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志.当R=1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2%.R=1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7%.R≥1.5称为完全分离.《中国药典》规定R应大于1.5.
分离度计算公式:R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
影响它的因素主要有以下几个:
1、柱子的长短与填料的粒径.柱子越长所装填料也越多,表面积也越大,吸附力也越大,所以分离能力也就高.同样同等长度的柱子粒径越细的,表面积也就越大,分离也就越好.
2、流动相(考虑反相条件下):
a:水相与有机相比例的大小,有机相高洗脱力强,组份在流动员相中分配的多,填料对其吸附能力弱,因此分离能力也就低.
b、不同溶剂的选择:拿甲醇和乙腈来说,它们俩的分离选择能力就不同.乙腈是非质子性,甲醇是质子性.所以当(甲醇)乙腈分离不好是,可以考虑一下乙腈(甲醇).
3、温度:温度高传质阻力会低,同样柱压力也会低,因此会使保留时间缩短,对分离有一定影响(只要温度不是偏离室温很大,对分离的影响不是很大)
4、流动的PH值.在分离一些酸、碱物质的时候,PH对分离的影响是很大的,有的会影响到出峰的顺序.因为在不同的PH下它们的解离状态会不同,因此会造就填料对它们的吸附能力改变.
5、离子对的添加(分离酸、碱化合物时),烷基铵盐类在PH=7.5时与强酸和弱酸形成离子对具有缓冲抑制弱碱作用.烷基磺酸盐在PH=3.5条件下与强碱和弱碱形成离子对,并缓冲抑制弱酸离子.
什么是分离度?影响分离度因素有哪些?又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用R表示.R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比. 相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值 。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度 。R越大,表明相邻两组分分离越好 。一般说当R<1时,两峰有部分重叠;当R=1.0时,分离度可达98%;当R=1.5时,分离度可达99.7% 。通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志 。当R=1时,称为4σ分离,两峰基本分离,裸露峰面积为95.4%,内侧峰基重叠约2% 。R=1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积为99.7% 。R≥1.5称为完全分离 。《中国药典》规定R应大于1.5 。分离度计算公式:R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
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