10、荧光素—溴试剂
检查不饱和化合物 。
溶液I:0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中 。溶液Ⅱ:5g溴溶于l00ml四氯化碳中 。先喷洒溶液I,然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内,黄色斑点出现后,于紫外光灯下检视,红色底板上显黄色荧光斑点 。更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考中检所标准品对照品 www.rmhot.com
11.荧光显色试剂
检查一般有机化合物 。
(1)0.2%2,7--'氯荧光素乙醇溶液 。
(2)0.01%荧光素乙醇溶液 。
(3)0.1%桑色素乙醇溶液 。
(4)0.05%罗丹明B乙醇溶液 。
喷洒任一溶液,不同的化合物在荧光背景上可显黑色或其它荧光斑点 。
二、苷类鉴定试剂
1、糖鉴定试剂
(1) -萘酚-硫酸试剂
检查还原糖 。
①溶液I:10% —萘酚乙醇溶液 。溶液Ⅱ:硫酸 。取lml样品的稀乙醇溶液或水溶液,加入溶液I 2~3滴,混匀,沿试管壁缓缓加入少量溶液Ⅱ,二液面交界处产生紫红色环为阳性反应 。
②15% —萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混匀后使用 。喷洒于薄层板上,100℃烤3~6min,多数糖显蓝色,鼠李糖显橙色,所显颜色于室温可稳定2天~3天 。
(2)斐林试剂
检查还原糖 。‘
溶液I:6.93g结晶硫酸铜溶于l00ml水中 。溶液Ⅱ:34.6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于l00ml水中 。取lml样品热水提取液,加入4~5滴用时配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液,在沸水浴中加热数分钟,产生砖红色沉淀为阳性反应 。如检查多糖和甙,取lml样品水提液,加入lmll0%盐酸溶液,在沸水浴上加热l0min,过滤,再用10%氢氧化钠溶液调至中性,按上述方法检查还原糖 。
(3)氨性硝酸银试剂
检查还原糖 。
硝酸银1g,加水20ml溶解,小心滴加适量氨水,边加边搅拌,至开始产生的沉淀将近全部溶解为止,过滤 。取lml样品的水溶液,加入lml试剂,混匀后,40℃微热数分钟,管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性反应 。本试剂也可作为色谱显色剂,喷洒后于110℃加热数分钟,显棕黑色斑点为阳性反应 。还原性物质如醛类、邻二酚类等有干扰 。
(4)茴香醛-硫酸试剂
检查糖类化合物 。
硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中,需临用前配制 。喷洒于薄层板上,105℃加热至显示色斑,不同糖显不同颜色 。
(5)苯胺-邻苯二甲酸试剂
检查糖类化合物 。
苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中 。作色谱显色剂用 。喷后105℃烤5min,显红棕色斑点 。
(6)l,3-二'羟基萘酚-磷酸试剂
检查酮糖、醛糖 。
0.2%1,3--'二羟基萘酚乙醇溶液50ml与85%磷酸50ml混合均匀后使用 。喷后105℃烤5min~10min,酮糖呈红色,醛糖显淡蓝色 。
(7)苯胺-二苯胺-磷酸试剂
检查糖类化合物 。
苯胺4ml、二苯胺4g及85%磷酸20ml溶于丙酮200ml中 。喷洒于薄层板上,85℃加热10min,不同糖显不同颜色 。
(8)2,3,5-三苯基氯化四氮唑(T.T.C)试剂
检查还原糖 。
溶液Ⅰ:4%T.T.C甲醇溶液 。溶液Ⅱ:4%氢氧化钠溶液 。临用时将溶液Ⅰ和Ⅱ等体积混合 。喷洒后,100℃加热5~10min,显红色斑点为阳性反应(醛类无干扰) 。
(9)三氯化铁-冰醋酸(K.K)试剂
检查 -去氧糖,常用于强心甙 。
溶液I:1%三氯化铁溶液0.5ml,加冰醋酸至l00ml 。溶液Ⅱ:硫酸 。取样品乙醇提取液lml,置试管中,水浴上蒸去乙醇,残渣用0.5ml溶液I溶解,沿试管壁缓缓加入溶液Ⅱlml,静置分层,上层渐显蓝色,下层显红色或棕色为阳性反应(其颜色随苷元羟基和双键的位置和个数不同而不同) 。
(10)占吨氢醇试剂
检查 -去氧糖(常用于强心甙) 。
10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸中,再加入lml硫酸混合 。取lml样品,加入试剂lml,置水浴上加热30min,显红色为阳性反应 。
(11)Gregg-Gisvold试剂
检查2.6-去氧糖 。
溶液I:10%三氯化铁溶液 。溶液Ⅱ:1%盐酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含2.8ml盐酸) 。0.5ml溶液I与100ml溶液Ⅱ混合 。将样品的乙醇溶液点于滤纸片上,晾干后,喷洒上述混合试剂,110℃加热5min,显蓝色为阳性反应 。
(12)3,5-二氨基苯甲酸-磷酸试剂
检查2-去氧糖 。
3,5-二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于80%磷酸25ml,加水稀释至60ml 。喷洒后,100℃加热15min,2-去氧糖在日光下显棕色,在紫外光下显黄绿色荧光 。
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