饲料粗蛋白测定时,为什么选无氮蔗糖做空白实验?

粗蛋白测定就是测定样品中的氮含量,一般是用凯氏定氮法,样品中只要有氮原子就认为是蛋白 。比如前些天的三聚氰胺 , 分子中有6个氮原子,虽然不是蛋白,但检测的时候就认为是蛋白,本来蛋白含量不够的,因为加了三聚氰胺 , 蛋白含量就够了 。
蔗糖分子中是不含氮的,但是蔗糖是从植物中提取的,难免会有蛋白等杂质,所以试验使用的必须是无氮蔗糖,蔗糖还有一个好处就是稳定 , 不会随着温度,水,电解质等的变化发生改变,所以是一个很好的空白对照 。
不用烘干,但检查某具体环节可能会用到烘干部分
以下是操作细则
⑴影响饲料原料和全价配合饲料质量的主要因素
1 自然变异
2 加工
3 掺假
4 损坏和变质
5 实验室分析结果和差异
⑵饲料质量检测的方法
1 饲料显微镜检测 主要目的是借外表特征或细胞特点对单独的或者混合的饲料原料进行鉴别和评价 。
2 点滴试验和快速试验
3 化学分析 分为常规分析和仪器分析
4 近红外光谱分析技术 又叫无损检测
5 生物检测
⑶ 饲料的质量包括以下四方面
1 营养质量
2 技术质量
3 动物,环境 , 消费者安全性
4 情绪质量
⑷我国饲料工业标准分为四级
1 国家标准
2 行业标准
3 地方标准
4 企业标准
⑸采样:从待测饲料原料或产品中获取一定数量具有代表性的部分作为样品的过程 。常用方法有四分法和几何法 。
⑹样品的制备:将样品经过干燥 , 磨碎和混合处理 , 以便进行理化分析过的程 。制备方法包括烘干,粉碎,和混匀 。
⑺采样的要求
1 样品必须具有代表性
2 必须采用正确的采样方法
3 样品必须有一定的数量
4 采样人员应有高度责任心和熟练的采样技能
5 重视和加强管理
⑻采样的步骤
1 采样前必须记录与原料或产品相关的资料
2 原始样品采集,从生产现场的一批受检的饲料或原料中最初采取的样品 。
3 次级样品,将原始样品混合均匀或简单的剪碎混匀,从中取出的样品 。
⑼饲料的鉴定是指根据饲料的形态特征,理化性质,鉴别饲料原料的种类,质量或混杂物的方法 。
⑽饲料的鉴定方法
A 感官鉴定方法 视觉,味觉,嗅觉 , 触觉
B 物理鉴定方法 筛别法(可用来判断颗粒的大小 , 细粉和异物含量及种类)容重法(测定饲料样品的容重,并与标准纯品的容重进行比较 , 可判断有无异物混入和饲料的质量 。)比重鉴别法(是根据饲料样品在一定比重的溶剂中的沉浮情况来鉴别是否混入异物,异物种类和混入的比例 。)颗粒耐久性指数(PDL)测定 硬度测定
C 快速化学鉴定方法
⑾饲料显微镜检测原理
是以动植物形态学,组织细胞学为基?。?将显微镜下所见饲料的形态特征,物化特点,物理性状与实际使用的饲料原料应有的特征进行对比分析的一种鉴别方法 。包括体视显微镜技术和生物显微镜技术 。
⑿显微镜检测的基本步骤:
1 被检样品的前处理 取有代表性的分析样品10—15g,进行以下工作a 记录外部特征;b 筛分处理;c 脱脂 。
2 被检样品的体视镜观察 将筛分好的各组样品分别平铺于纸下或培养皿中,置于体视镜下,从低倍至高倍进行检查 。
3 被检样品的生物镜观察首先进行样品处理,一般采用酸与碱进行处理 。然后进行制片于观察 。
⒀饲料中水分的测定
通常有5种途径 a 烘箱干燥 b 真空干燥 c 甲苯蒸馏 d 冷冻干燥 e 水分快速测定装置 。对于一般饲料原料和产品,通常采用烘箱干燥法测定水分 。测定原理:样品在(105±2)°C烘箱内 , 在一个大气压下烘干,直至恒重 , 遗失的质量为水分,在该温度下干燥,不仅饲料中的吸附水被蒸发,同时一部分胶体水分也被蒸发,另外还有少量挥发油挥发 。
⒁饲料中粗蛋白质的测定
饲料中的有机物质在催化剂的帮助下,用浓硫酸进行消化作用 , 使蛋白质和铵态氮都转变成氨气并被硫酸吸收生成(NH4)2SO4,而非含氮物质,则以CO2,H2O,SO2状态溢出 。消化液在浓硫酸的作用下进行蒸馏使氨溢出,用硼酸溶液吸收结合成为四硼酸铵,然后以甲基红溴甲酚绿作指示剂,用HCL标准溶液滴定 , 测出氮的含量,再乘以6.25,即为样品中粗蛋白质的含量 。
⒂饲料中粗脂肪的测定
A 油重法用乙醚等有机溶剂反复浸提饲料样品,使其中脂肪溶于乙醚,并收集于盛醚瓶中,然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收,直接称量盛醚瓶中的脂肪重,即可计算出饲料样品中的脂肪含量 。B 残余法用乙醚等有机溶剂反复浸提饲料样品 , 使其中脂肪溶于乙醚出去,根据式样质量和残渣质量之差计算粗脂肪含量 。因除脂肪外,还有有机酸,磷脂,脂溶性维生素,叶绿素等,因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物 。
⒃饲料中粗纤维的测定
用固定量的酸和碱,在特定条件下消煮样品,再用乙醇除去可容物,经高温灼烧扣除矿物质的量,所余量称为粗纤维 。它不是一个确切的化学实体,只是在公认强制规定条件下,测出的概略养分 。其中以纤维素为主,还有少量的半纤维素和木质素等 。
步骤:a 称样: b 酸处理:c 抽滤:d 碱处理:e 烘干:f 灰化
⒄饲料中粗灰分的测定
式样在550摄氏度灼烧后,所得残渣,用质量分数表示 。残渣中主要是氧化物,盐类等矿物质,也包括混入饲料中的沙石 , 土等,故称粗灰分 。
⒅饲料中钙的测定
将试样中有机物破坏,钙变成溶于水的离子 , 并与盐酸反应生成氯化钙,然后在溶液中加入草酸铵溶液使钙成为草酸钙白色沉淀,用硫酸溶液溶解草酸钙,再用高锰酸钾标准溶液滴定游离的草酸根离子,根据高锰酸钾溶液的用量计算式样中钙的含量 。用甲基红作指示剂 。
⒆ 饲料中总磷的测定
将式样中有机物破坏,使磷游离出来 , 在酸性溶液中,用钒钼酸处理 , 生成**的(NH4)3PO4NH4VO3·16MoO3,在波长420nm下进行比色测定 。
⒇饲料中盐分的测定
在中性溶液中,Cl-与CrO42-能分别与Ag+形成溶解度较小的AgCl白色沉淀和溶解度相对较大的砖红色Ag2CrO4沉淀 。因此,在滴入AgNO3标准溶液的过程中,只要溶液中有适量的K2CrO4,首先析出的是溶解度较小的AgCl沉淀 , 而当快达到等当点时,Ag+浓度随溶液中Cl-的减少而迅速增加 , 当增加到Ag2CrO4沉淀所需要的Ag+浓度随溶液中Cl-的减少时,便析出Ag2CrO4沉淀,使溶液呈砖红色 。
⒇配合饲料混合均匀度的测定
通过氯离子选择性电极的电位对溶液中氯离子的选择性响应来测定氯离子的含量 , 以饲料中氯离子含量的差异来反映饲料的混合均匀度 。
⒇木质素的检验
取少量饲料样品,加入20g·L-1间苯三酚95%酒精溶液至浸过样品 , 再加入浓盐酸1~2滴 。若有木质素存在,则呈深红色 。此时,再加入水 , 呈深红色的木质素会浮在水面上,就更容易分辨 。
⒇总能的测定
将由消化代谢试验所用的饲料或日粮以及所收集的粪,尿样品,制备成一定质量的测定式样,装于充有(25±5)kg·cm-2纯氧氧氮中进行燃烧,燃烧所产生的热量为氧氮周围已知质量的蒸馏水及热量计整个体系所吸收,并有贝克曼温度计读出水温上升的读数 。钙上升的温度乘以热量计体系和水的热容之和,即可得出式样的燃烧热 。
⒇原子吸收光谱分析法测定饲料中微量元素
原子吸收光谱分析法是基于光源辐射出具有待测元素特征的光谱 , 当通过式样所产生的原子蒸汽时,被蒸汽中待测元素的基态原子所吸收,根据辐射光强度减弱程度,即可求出式样中待测元素的含量 。原子吸收光谱分析仪主要由光源,原子化系统 , 分光系统,测光系统,数据处理系统和显示系统组成
⒇微量元素的分析(原子吸收法)
基本原理:利用物质的气态原子对特定波长的光的吸收来进行分析的方法 。
基本步骤:
1 样品前处理:a 干法灰化法(用瓷坩埚或铂金坩埚在电炉上炭化然后转移至高温电阻炉中3个小时) 。b 湿法灰化法(HNO3—HCLO3(4~5:1)→浸泡过滤→低温消化(200~300)→高温沸腾(<500度)
2 样品分解液的制备转移至容量瓶中定容
3 标准曲线的制备
4 样品的测定
5 结果计算
⒇维生素ADEK定量分析
1 皂化(碱性条件下,75摄氏度,脂类水解,再用乙醇—NAOH溶液回流30min,加Vc防止氧化)
2 提取 乙醚,少量多次,分液漏斗
3 洗涤 至中性
4 浓缩 旋转蒸发仪,K—E浓缩器
5 过滤
【饲料粗蛋白测定时,为什么选无氮蔗糖做空白实验?】
6 上机测定