文献精读 | TLR4-MyD88信号通路参与子宫内膜异位症相关疼痛的发生发展( 二 )

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▲ 图1

EM组HMGB1在伤害性刺激传输途径中表达上调

免疫荧光结果显示HMGB1在感觉神经元中表达，且HMGB1分布从细胞核向胞浆转移，呈现促炎反应状态。与Sham组（21.27%）相比，胞浆中的HMGB1在EM组大鼠背根神经节表达在术后7d(40.36%)和术后14d(45.19%)上调(图2a–c和图S1A) 。在术后14d ，研究者检测了DRGs中的表达HMGB1感觉神经元的不同亚群情况，其中HMGB1+神经元中39.86% 与降钙素基因相关肽(CGRP)共标、43.18%与非肽能等电蛋白B4(IB4)共标， 30.21%与瞬时受体电位香草酸-1(TRPV1)共标(图2d-f和图S1b) 。此外，相较于Sham组， EM组大鼠SDH中HMGB1表达显著上调 (图2g, h和图S1c) ，且主要分布在SDH浅层。以上结果提示， EM在中枢和外周神经系统中均诱导HMGB1表达上调，并可能激活下游TLR4信号通路(图2i-k) 。

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▲ 图2
EM组中TLR4在伤害感受器中表达上调
在EM组术后7d时，研究者检测到DRG中TLR4蛋白表达上调达到峰值，而Sham组和Naive组并未出现该现象（图3a ， b）。免疫荧光结果进一步表明， DRG中表达TLR4的神经元数量比例在EM组中增加(Sham 19.84%；EM 39.39%) ，并且主要在直径较小DRG神经元中表达差异显著(图3c, d) 。此外，研究者通过免疫荧光检测了EM组中TLR4+感觉神经元的亚群，表达上调的TLR4+神经元与以下标志物共标情况如下：IB4+ (18.90%~36.36%),CGRP+(23.72%~64.99%)和TRPV1+(32.12%~49.77%) (图4g) 。

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▲ 图4
EM组DRG中神经元MyD88表达上调
研究者检测到在EM组中DRG中MyD88的蛋白表达水平在术后逐渐升高，并在术后14d至21d一直保持较高的表达水平(图5a, b) 。免疫荧光显示MyD88定位于DRG中的感觉神经元。与Sham组相比， EM组大鼠背根神经节中表达MyD88蛋白的神经元比例增加(Sham 43.14%; EM 64.44%) ，尤其是小径神经元(Sham 49.00%；EM 80.17%)(图5c, d) 。此外，研究者通过免疫荧光检测了EM组中MyD88+感觉神经元的亚群情况(图6a-f)：MyD88+IB4+神经元(Sham 19.12%；EM 48.11%)、MyD88+CGRP+神经元(Sham 22.05%；EM 33.72%)和yD88+TRPV1+神经元(Sham 19.77%；EM 46.27%) ，以上三类亚群均在EM组中表达上调（图6g）。综上，子宫内膜组织异位后， DRG感觉神经元中的TLR4-MyD88信号可能被激活。

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