按关键词阅读: 染色 革兰氏
1、1. 1.11.1细菌染色法细菌染色法 单染色法:只用单染色法:只用一种一种染料染色 , 能清楚观察菌体大染料染色 , 能清楚观察菌体大 小、形态与排列 , 小、形态与排列 , 不能不能鉴别细菌 。
鉴别细菌 。
复染色法(鉴别染色):采用复染色法(鉴别染色):采用两种以上两种以上的不同染料的不同染料 进行先后染色 , 可将细菌染成不同的颜色 , 以便鉴进行先后染色 , 可将细菌染成不同的颜色 , 以便鉴 别细菌 。
别细菌 。
抗酸染色抗酸染色: :用于检查结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等用于检查结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等抗酸抗酸 性细菌性细菌(一些一旦用某些方法染色后 , 能够抵抗酸性酒一些一旦用某些方法染色后 , 能够抵抗酸性酒 精脱色的细 。
2、菌精脱色的细菌) ) , 阳性者为红色 。
, 阳性者为红色 。
特殊染色:荚膜染色 , 芽胞染色 , 鞭毛染色 , 极体染色特殊染色:荚膜染色 , 芽胞染色 , 鞭毛染色 , 极体染色 (用于白喉杆菌异染颗粒染色) 。
(用于白喉杆菌异染颗粒染色) 。
2. 1.21.2革兰氏染色法革兰氏染色法 革兰染色法是丹麦内科医生革兰染色法是丹麦内科医生 Christain GramChristain Gram 于于18841884年创立的一种细菌年创立的一种细菌复染色复染色方法 , 已有方法 , 已有130130多多 年的历史 , 仍在广泛使用 。
年的历史 , 仍在广泛使用 。
3. 1.31.3革兰氏染色法的原理革兰氏染色法的原理 结晶紫结晶紫 卢戈碘液液卢 。
3、戈碘液液 95%乙醇乙醇 复红复红 G-菌:菌: 类脂质类脂质 肽聚糖肽聚糖 G+菌:菌: 肽聚糖肽聚糖 交联度大交联度大 类脂质类脂质 通透性学说通透性学说、等电学说、化学学说 4. 1.31.3革兰氏染色的意义革兰氏染色的意义 v鉴别细菌:把细菌分成鉴别细菌:把细菌分成G G+ +和和G G- -两大类 。
两大类 。
v选择抗菌药物:例如选择抗菌药物:例如G G+ +球菌球菌对青霉素敏感对青霉素敏感, ,G G- -杆菌杆菌 耐药 。
耐药 。
v了解细菌的致病机理:了解细菌的致病机理:G G+ +菌大多产生外毒素菌大多产生外毒素,G,G- -菌菌 产生内毒素 。
产生内毒素 。
革兰染色的步骤革兰染色的 。
【革兰氏|革兰氏染色(1)】4、步骤 涂片涂片 干燥干燥 固定固定 染色染色 5. 实验器材与材料实验器材与材料 接种环、细菌分离培养物(上次实验平板)接种环、细菌分离培养物(上次实验平板) 接种环接种针 , 酒精灯 , 生理盐水接种环接种针 , 酒精灯 , 生理盐水2 2支 , 镜油瓶、支 , 镜油瓶、 拭镜纸拭镜纸1 1套 , 吸水纸套 , 吸水纸1 1本 , 载玻片本 , 载玻片4 4张 , 细菌分离培张 , 细菌分离培 养物(上次实验平板) , 革兰氏染色液养物(上次实验平板) , 革兰氏染色液 6. 2 2 涂片的制备涂片的制备 灭菌接种环灭菌接种环 无无 菌菌 操操 作作 7. 2 2 涂片的制备涂片的制备 细菌合适 细菌较多 接种环取盐接种环取盐 水水3ul3ul2 。
5、 2滴滴, , 水滴间距小于水滴间距小于 2cm2cm 。
取 菌 苔 少 许取 菌 苔 少 许 (1mm1mm小菌落半个)小菌落半个) 与盐水混匀 , 涂成与盐水混匀 , 涂成 大于大于1cm1cm2 2均匀涂膜均匀涂膜 。
涂毕涂毕环移至涂膜中环移至涂膜中 央侧立 , 待环内菌膜破央侧立 , 待环内菌膜破 裂 , 接种环烧灼灭菌 。
裂 , 接种环烧灼灭菌 。
无无 菌菌 操操 作作 8. 2 2 涂片的制备涂片的制备 固定固定 FixationFixation 涂片涂片smearsmear 干燥干燥drydry 手持载玻片一端 , 涂膜朝手持载玻片一端 , 涂膜朝 上 , 两个涂膜快速通过火焰上 , 两个涂膜快速通过火焰 外层外层3 3 。
6、次 , 时间次 , 时间2 23 3秒钟 。
秒钟 。
促使菌体蛋白质凝固 , 固定促使菌体蛋白质凝固 , 固定 在载玻片上 , 以免染色水洗的在载玻片上 , 以免染色水洗的 时候 , 细菌被水洗掉 。
时候 , 细菌被水洗掉 。
9. 初染初染:结晶紫染液染结晶紫染液染 水洗 , 甩干水洗 , 甩干 媒染媒染:卢戈氏碘液染卢戈氏碘液染 水洗 , 甩干水洗 , 甩干 : 95%乙醇脱色约乙醇脱色约 水洗 , 甩干水洗 , 甩干 复染复染: 复红染液染复红染液染 水洗 , 甩干水洗 , 甩干 印干印干 油镜观检油镜观检 染染 色色 3 3 革兰氏染色的方法和步骤革兰氏染色的方法和步骤 10. 生物安全警告生物安全警告 BIOHAZARDBIOHAZARD l 本次实验操 。
7、作 , 可产生几十至几百个微生物本次实验操作 , 可产生几十至几百个微生物气溶气溶 胶颗粒 。
胶颗粒 。
l 气溶胶粒径气溶胶粒径100um100um沉降很快沉降很快, ,50um50um在在0.4s0.4s内扩内扩 散开散开, ,5um5um通过呼吸道直接到达肺泡 。
通过呼吸道直接到达肺泡 。
l 实验室感染统计分析结果发现 , 不明原因的感染实验室感染统计分析结果发现 , 不明原因的感染 高达高达82%82% , 大多数是气溶胶在空气中扩散引起的 。
, 大多数是气溶胶在空气中扩散引起的 。
l 实验时应坐稳 , 很专注 , 不分心 , 在火焰周围实验时应坐稳 , 很专注 , 不分心 , 在火焰周围 10102020厘米内操作 , 保持安静、有序 , 尽量少说厘米内操作 , 保持安静、有序 , 尽量少说 话 , 以免感染病原菌 。
话 , 以免感染病原菌 。
11. THANKS 12. 。
来源:(未知)
【学习资料】网址:/a/2021/0504/0022061632.html
标题:革兰氏|革兰氏染色(1)