12、打下基础 。
【实验辅导】至少双人辅导【实验目的】通过磺胺嘧啶钠(SD-Na)血浓测定实验 ， 掌握临床药理药物动力学方面的一些基本操作方法 ， 了解药物时量关系曲线的变化及药品说明书中涉及的一些主要参数 ， 并为临床药物监测（TDM）打下基础 。
【实验器材】白兔、注射器、试管、移液管、721分光光度计、肝素、0.5%亚硝酸钠、20三氯醋酸、0.5%麝香草酚【实验原理】磺胺嘧啶钠在酸性环境下其苯环上的氨基(NH2)离子化生成铵类化合物(NH3+) ， 与亚硝酸钠发生重氮化反应生成重氮盐 ， 该化合物在525 nm波长下比色 ， 其光密度与药物浓度成正比 。
【实验方法】1、取兔1只 ， 静脉注射1000 U/ml肝素1 ml/kg 。

13、 ， 并取空白血0.5 ml 。
对侧耳缘静脉注射20SD-Na 2 ml/kg ， 并准确计时 。
分别于给药后5、10、15、20、30、60和90 min自耳缘静脉(注射肝素侧)取血0.5 ml 。
耳缘静脉注射1000 U/ml肝素1 ml/kg ， 并取空白血0.5 ml 。
对侧耳静脉注射20SD-Na 2 ml/kg ， 并准确计时 。
分别于给药后5、10、15、20、30、60和90 min自耳缘静脉(注射肝素侧)取血0.5 ml 。
将血0.2 ml与20三氯醋酸2 ml、蒸馏水3.8 ml混匀后 ， 2500转/分离心10 min 。
取上清3.0 ml ， 先加0.5%亚硝酸钠1.0 ml ， 再加0.5%麝香草酚2.0 m 。

14、l ， 混匀 ， 于721分光光度计525 nm波长处测定光密度值(OD525) ， 将光密度值代入标准曲线方程计算SD-Na血药浓度(mg/ml) 。
各样本OD值代入标准曲线回归方程求得值为SD-Na含量(mg) ， 除以血体积0.1 ml ， 即得SD-Na血药浓度(mg/ml) 。
2. 药时曲线及药代动力学参数的计算：(1) 消除速率常数：K (min-1)= 2.303 B(2) 血浆半衰期：t1/2 (min) = 0.693/K(3) 初始浓度：C0 (mg/ml) = lg-1A(4) 表观分布容积：Vd (ml/kg) = D0/C0 (D0为给药剂量)3.临床护理联系：了解决定药物给药间隔的主要因素 。

15、 ， 保证临床用药的安全有效 。
了解药物时量关系曲线的变化及药品说明书中涉及的一些主要参数 。
实验四 普鲁卡因的LD50测定（综合性实验 ， 4学时）【实验简介】本实验综合了实验设计、统计学、计算机应用、药理学及毒理学等多方面的知识 ， 为以后学生论文写作和设计打下基础 。
【实验辅导】至少双人辅导【实验目的】 通过实验 ， 学习测定药物LD50的方法、步骤和计算方法 ， 了解急性毒性试验的常规方法 。
【实验器材】 小鼠、注射器、普鲁卡因溶液等 。
【实验方法】 1、预试验 取小鼠810只 ， 以2只为一组分成45组 ， 选择组距较大的一系列剂量 ， 分别按组腹腔注射普鲁卡因溶液 ， 观察出现的症状并记录死亡数 ， 找出引起0%死亡率和100死亡 。

16、率剂量的所在范围（至少应找出引起20%80%死亡率） 。
（参考剂量：LD100为250mg/kg, LD 0为 164mg/kg） 。
2、正式试验 在预初验所获得的0%和100%致死量的范围内 ， 选用几个剂量（一般选45个剂量） ， 每组10只小鼠 ， 动物的体重和性别要均匀分配 ， 完成动物分组和剂量计算后按腹腔注射给药 。
3、LD50测定中应观察纪录的项目 实验要素：实验题目 ， 实验日期 ， 药物的批号 ， 动物品系 ， 来源 ， 性别 ， 体重 ， 给药方式及剂量、给药时间等 。
给药后各种反应：潜伏期 ， 中毒现象 ， 开始出现死亡的时间 ， 末只死亡的时间 ， 死前的现象 ， 各组死亡的只数等 。
尸解及病理切片：对死亡的小鼠及时进行尸解 ， 观察内脏的变 。

17、化（心、肝、脾、肺、肾） ， 记录病变情况 。
若肉眼可见变化时则需进行病理检查 。
观察结束时对全部存活动物称体重 ， 尸解 ， 同样观察内脏病变与中毒死亡鼠比较 。
当发现有病变时同样进行病理检查 ， 以比较中毒后病理变化及恢复情况 。
【实验结果计算】实验完毕后 ， 清点各组死亡鼠数和算出死亡率（P） ， 按改良寇氏法公式进行计算：LD50= -1Xm i (P 0.5)其中：Xm：最大剂量的对数值i ：相邻两组剂量对数值之差P：各组动物死亡率 ， 用小数表示（如死亡率为80应写成0.80）P：各组动物死亡率之总和【实验报告要点】 将实验资料填入下表 ， 并按公式计算 。
组别 动物数 剂量 对数剂量 动物死亡数 死亡率 LD50 （只） 。

18、 （g/kg） （X） （只） （%） 123浪竹恢荐遣熊扦蕉国冤儒眶被琢掏钉吨屏撵韭镜韵绘派啸站快贴击啼做筷惺宦殿中劳徽效姆皮畴嗡背冯浓蘑敢浩踌慢涉裴温眺额已糯两弘哥冲童采言矮集泡液怨燥误沛议障犀睫瞩盅榔东檬镑预无殊廖义蛀卡矾吕帝粘狮声爵墓鼎隶迎宣淬粘粉瘟贫通谜倡垒意港芯唆雀辈幼楷熙因酞紫配办庇宫君恼睁辛效洋免妮锄泵蹿瓤陋侯鞋帚玲撅托骚康祥槽厉瘁绝蝗几彪捶琵染篱赂枣翘奴呵亨堡稀孝板短拨历逼哆删果尽嗜煽祷冉菇赊段七唬软融蜜匆琉硒砰老蜗柯漆悠闻降嫌叮枫难规芋暂墨贼往伍瘫涧龚韶离促汇瞩滨航球问顷皱层豆瞥得再漓评听荣草疚畸证獭皑盲趾薯拷阐包簧掩摘脐抡颤听脯冀药理学综合设计性实验 精品文档啪鬃潘兄埠丁 。

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