1、带电粒子在电场中的迁移方式主要依据哪些因素？带电粒子在电场中的迁移方式主要依据分子尺寸大小和形状、分子所带电荷或分子的生物学与化学特性 。
2、依据电泳原理 ， 三种形式的电泳分离系统是什么？常用的是什么？依据电泳原理 ， 有三种 。

40、形式的电泳分离系统：移动界面电泳、区带电泳、稳态电泳；其中区带电泳是目前常用的电泳系统 。
区带电泳中的常用技术：载体电泳：粉末电泳、纸电泳、凝胶电泳、聚焦电泳；无载体电泳：自由电泳、毛细管电泳凝胶电泳的支持介质：聚丙烯酰胺凝胶；琼脂糖凝胶影响丙烯酰胺聚合的主要因素:引发剂和增速剂的浓度;
系统pH值;
温度;
分子氧ABC-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的分子筛效应:凝胶中的大分子分离取决于它的电荷、尺寸和形状 。
凝胶的这种用于分离不同尺寸分子的特性是由于它的尺寸筛分能力 ， 这种现象被称为分子筛效应 。
图中A ， B ， C均为阳离子 ， 在直流电场作用下电泳情况示意图分子量大小依次为MA=MBMC ， 所带电荷量相同QA=QB=Q 。

41、C1、结晶：溶液中的溶质在一定条件下 ， 因分子有规则的排列而结合成晶体 ， 晶体的化学成分均一 ， 具有各种对称的晶体 ， 其特征为离子和分子在空间晶格的结点上呈规则的排列；结晶的实质是指溶质自动从过饱和溶液中析出 ， 形成新相的过程2、结晶的步骤：过饱和溶液的形成；晶核的形成；晶体生长其中 ， 溶液达到过饱和状态是结晶的前提；过饱和度是结晶的推动力 。
二. 讨论题1. 请结合图示简述凝胶排阻色谱（分子筛）的分离原理；答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构 ， 其分离原理是具有不同分子量的溶质分子 ， 在流经柱床是 ， 由于大分子难以进入凝胶内部 ， 而从凝胶颗粒之间流出 ， 保留时间短；而小分子溶质可以进入凝胶内部 ， 由于 。

42、凝胶多孔结构的阻滞作用 ， 流经体积变大 ， 保留时间延长 。
这样 ， 分子量不同的溶质分子得以分离.2. 绘制结晶过程中饱和曲线和过饱和曲线图 ， 并简述其意义；答：结晶过程中的饱和温度曲线和不饱和温度曲线的简图如右图所示：S-S曲线为饱和温度曲线 ， 在其下方为稳定区 ， 在该区域溶液为不饱和溶液 ， 不会自发结晶；T-T曲线为过饱和温度曲线 ， 在其上方为不稳定区 ， 能够自发形成结晶；S-S曲线和T-T曲线之间为亚稳定区 ， 在该区域 ， 溶液为过饱和溶液 ， 但若无晶种存在 ， 也不能自发形成晶体3. 何谓亲和吸附 ， 有何特点？答：亲和吸附是吸附单元操作的一种 ， 它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段 。
亲和吸附剂的 。

43、组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基 。
亲和吸附的特点是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温和 ， 但载体制备难度大 ， 通用性差 ， 成本较高 。
4. 简述结晶过程中晶体形成的条件；答：结晶过程包括过饱和溶液的形成、晶核的形成及晶体的生长三个过程 ， 其中溶液达到过饱和状态是结晶的前提 ， 过饱和度是结晶的推动力 。
5. 试比较常规聚丙稀酰胺凝胶电泳与SDS PAGE的分离原理；答：常规聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS-PAGE均为凝胶电泳的一种 。
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质是依据其电荷（性质、荷电量）、分子形状和分子大小（分子量）差异实现分离的；SDS-PAGE由于加入了SDS和强还原剂（DTT等） ， 破坏了蛋 。

44、白质分子的高级（二级、三级、四级）结构 ， 并与蛋白质形成荷大量负电荷的聚合物 ， 消除了不同蛋白质分子电荷及分子形状差异 ， 而仅将分子量差异作为分离依据 ， 常用于测定未知蛋白质的亚基分子量 。
6. 何谓色谱的理论塔板数 ， 如何计算？答：理论塔板数反应不同时刻溶质在色谱柱中的分布以及分离度与柱高之间的关系 。
N-理论塔板数 tR-保留时间 W1/2半峰宽 Wb-峰底宽7. 简述疏水层析的原理 ， 并说明基本操作步骤；答：在载体表面连接上疏水的直链碳链或其他疏水基团 ， 可以与蛋白质的某些疏水基团相互作用 ， 从而实现多组分的分离 。
在高盐浓度下 ， 蛋白质表面的疏水区域暴露 ， 固定相表面修饰了一些疏水基团 ， 这样蛋白质的疏水部分即可 。

45、与固定相发生较强的疏水相互作用 ， 从而被结合在固定相表面 ， 而一旦降低流动相的盐浓度即可实现蛋白质的洗脱 。

来源：(未知)

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标题：生物|生物分离工程期末复习题( 七 )