8. 结合SDS PAGE电泳的分离原理说明未知蛋白质分子量的测定方法；答：以不同分子量的标准蛋白进行SDS-PAGE电泳得到不同标准蛋白的电泳迁移率 ， 制作标准曲线 ， 然后对未知蛋白在相同条件下进行SDS-PAGE电泳 ， 测定迁移率 ， 从标准曲线得到相应的分子量 。
9. 请说明在进行SDS PAGE电泳之前 ， 样品的处理方法 ， 并解释其原因；答：样品处理方法：加入SDS和还原剂DTT.原因：SDS-PAGE由于加入了SDS和强还原剂 ， 破坏了蛋白质分子的高级结构 ， 并与蛋白质形成带大量负电荷的聚合物 ， 消除了不 。

46、同蛋白质分子电荷及分子形状的差异 ， 而仅将分子量差异作为分离的依据 ， 常用于测定未知蛋白质的亚基分子量 。
10. 简述载体两性电介质梯度等电聚焦（IEF）的分离原理；答：在支持介质中加入载体两性电解质 ， 通以直流电后在两极之间形成稳定、连续和线性的pH梯度 ， 当带电的蛋白质分子进入该体系时 ， 便会产生移动 ， 并聚集于相当其等电点的位置 。
11. 离子交换分离单元的基本过程有哪几部分？答：样品准备离子交换剂和层析剂的制备上样目的蛋白的洗脱洗脱液的鉴定和回收离子交换剂的再生和储存12. 试比较物理吸附与化学吸附过程；答：物理吸附吸附剂与吸附质之间的作用力是分子间作用力 ， 物理吸附无选择性 ， 吸附量可因物系不同而相差很 。

47、多 ， 可在低温下进行 ， 不需要较高活化能 ， 可以是单分子层也可以是多分子层 。
化学吸附在吸附质与吸附剂之间有电子转移 ， 形成化学键 ， 因此化学吸附需要较高的活化能 ， 需要在较高温度下进行 ， 化学吸附放出的热量很大 ， 只能是单分子层吸附 ， 且不易吸附和解吸 ， 平衡慢 ， 化学吸附选择性较强13. 简述活性炭的吸附规律？答：活性炭是非极性吸附剂 ， 因此在水溶液中吸附力最强 ， 在有机溶剂中吸附力较弱 。
在一定条件下 ， 活性炭对不同物质的吸附力不同 ， 一般遵循下列规律： 极性基团多的化合物的吸附力大于极性基团少的化合物；对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物； 性炭对分子量大的化合物的吸附力大于分子量小的化合物 ； 酵液的pH与活性炭的 。

48、吸附率有关； 活性炭吸附溶质的量在达到平衡前一般随温度提高而增加 ， 但在提高温度时应考虑到溶质对热的稳定性 。
判断题1. 色谱分离技术中固定相都是固体 。
（ ）2. 采用凝胶层析分离时 ， 在所用的凝胶的分离范围内 ， 溶质分子量越小洗脱越快 。
（ ）3. 流动相为气体的色谱称为气相色谱 。
（ ）4. 凝胶层析会使得大分子后流出 ， 小分子先流出 。
（ ）5. 酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂上的吸附顺序为酸性中性碱性氨基酸 。
6. 采用活性炭为吸附剂时 ， 所用洗脱剂应从高极性开始 ， 逐渐降低洗脱剂的极性 。
7. 凝胶层析会使得大分子后流出 ， 小分子先流出 。
8.离子交换树脂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固体化合物 。
。

49、9.离子交换的推动力是离子浓度差 。
（ ）10. 离子交换树脂的交联度大 ， 其网孔大 ， 机械强度大 。
( )11. 利用阳离子交换树脂去除钙镁离子后的水称为去离子水 。
( )12. 由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响 ， 故一般通常采用改变离子强度的梯度洗脱 。
13.测定阴离子交换树脂的总交换容量可采用Cl-将OH-交换下来后用稀盐酸滴定洗脱液中OH-的量即得到树脂的总将换容量 。
（ ）14.采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子的大小 ， 先将蛋白质混合物上柱然后进行洗脱 ， 小分子的蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来 。
（ ）15蛋白质变性 ， 一级、二级、三级结构都被破坏 。
（ ）16酸性、中性、碱性氨基酸 。

50、在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸中性氨基酸酸性氨基酸（ ）17离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物 。
（ ）18离子交换速率总是取决于内部扩散速率 。
（ ）19只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上的离子具有更高的选择性时 ， 静态离子交换操作才有可能获得较好的效果 。
（ ）20层析分离是一种化学的分离方法 。
（ ）21离子交换剂可以分为3部分：高分子聚合物基质、电荷基团和被交换离子 。
（ ）22凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定 。
（ ）23在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小 。

来源：(未知)

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标题：生物|生物分离工程期末复习题( 八 )