如果是大批量的快速繁殖培养 ， 则可使用一般蒸馏水或纯净水以降低生产成本 ， 提高生产效益 。
,遗传学第2章 基本技术,139,实验室存放各类试验用水的容器应使用塑料制品 ， 不能使用金属容器 。
存放容器应定期清洗 ， 避免青苔和微生物滋生 。
玻璃容器亦不适于存放蒸馏水或纯净水 ， 因为良好的透光性常常极易使青苔生长 。
,遗传学第2章 基本技术,140,其它附加成分,琼脂 活性炭 附加复合成分,遗传学第2章 基本技术,141,（1）琼脂或卡拉胶 琼脂是从红藻等海藻中提取的一种高分子碳水化合物 主要作用：使培养基在常温下凝固 不参与代谢、不提 。

51、供营养 首选的固化剂 。
,遗传学第2章 基本技术,142,琼脂的用量：410g.L-1 增加琼脂可克服“玻璃化现象”。
凝固力下降的因素 长时间的高温 过酸 高温 存放时间过久,遗传学第2章 基本技术,143,（2）活性炭（AC）及硝酸银 活性炭的作用： 利用其吸附能力 ， 降低分泌物的毒害作用 ，使培养基变黑 ， 有利于植物生根 有利于形态发生和器官形成 可以促进花药培养时的雄核发育 ， 有利于形成单倍体植株； 悬浮培养的胡萝卜细胞失去胚状体发生能力后 ， 添加14%的活性炭可恢复其胚胎发生能力 。
,遗传学第2章 基本技术,144,活性炭使用浓度 不宜过高 ， 一般在0.021.0% ， 多用0.10.5% 。
活性炭 。

52、的吸附能力 还与温度有关 ， 低温下吸附能力强 ， 高温下吸附能力减弱 ， 甚至解吸附 。
活性炭会削弱琼脂的凝固能力 需提高琼脂用量 ， 凝固之前摇匀 。
,遗传学第2章 基本技术,145,AgNO3 促进愈伤组织分化器官或胚状体 能使某些原来再生困难的物种再生植株 Ag+能起到抑制乙烯活性的作用， 而乙烯抑制细胞分裂 ， 从而克服试管苗玻璃化、早衰及落叶 使用浓度：110mg.L-1 使用前过滤灭菌 ，避光保存(见光分解) 培养基长期含AgNO3 ， 会导致植株畸形,遗传学第2章 基本技术,146,（4）抗生素的利用 处理内生菌 甲基托布津、多菌灵、百菌清效果好 链霉素、青霉素、地霉素、新霉素、夹竹桃霉素、抗菌肽也可酌 。

53、情试用 。
,遗传学第2章 基本技术,147,常用培养基配方,常用培养基配方： MS（Murashing and Skoog, 1962） White（White, 1934） B5 (Gambor et al, 1968) N6 (朱至青 ， 1974),遗传学第2章 基本技术,148,二、几类常用培养基的特性,1、高盐型培养基 MS、LS、RM、BL ， BM ， ER和MT 其特点：无机盐浓度高 ， 养分齐全 ， 铵态氮和硝态氮含量高 ， 比例也比较适合 ， 不需要添加更多的有机附加物 ， 离子平衡情况较好 ， 使用的误差较小 。
利于愈伤组织的诱导和增殖 ， 能满足植 物组织对矿质营养的要求 ， 适用于高需 肥量植物种类或生长迅速的培 。

54、养材料 。
,遗传学第2章 基本技术,149,2、高KNO3型培养基 B5和N6 喜钾、喜硝或忌铵的外植体材料适用 B5的特点是铵盐较低 ， 盐酸硫胺素较高 ， 对枇杷胚状体的诱导效果较佳 。
N6由我国的朱至清等发明 ， 高硝酸铵 ， 不含钼 ， 特别适用于禾谷类作物的花药培养 ，曾获国家发明二等奖 ， 在国内外都有广泛的使用 。
,遗传学第2章 基本技术,150,3、中盐型培养基 包括H（1967） ， Nitsch（1969）和Miller（1963）等也有广泛的应用 。
,遗传学第2章 基本技术,151,4、低盐型培养基 特点是无机盐浓度低 ， 适用于生根培养、成熟胚胎培养或种质材料的保存 包括White（1943） ， 改良Whit 。

55、e（1963） ， HB（1963） ， WS（1966）和Knop（1965）等 其中Knop（1965）仅包括4种成分 ， 可用作水培的培养液 ， 改良White（1963）则比较多用于木本植物 。
,遗传学第2章 基本技术,152,三、培养基的配制,大量元素配制成10-20的母液 微量元素配制成100-200的母液 激素单独配制成mg/ml的母液 配制培养基时按需要按比例加入 水最好是蒸馏水或双蒸水 尽可能采用分析纯或化学纯级别的试剂,遗传学第2章 基本技术,153,1、MS母液（stock solution）配制及保存 配制各单成分的母液 ， 配成10X、100X、1000X； 配制培养基的母液： 大量、微量 。

56、、 有机、Fe盐 混合各单成分时注意防止产生沉淀 注意配制各种激素时需要预溶解；,遗传学第2章 基本技术,154,遗传学第2章 基本技术,155,植物生长调节物质 通常用mg.mL-1较方便 ， 一般宜配制成0.5或1.0mg.mL-1的母液,遗传学第2章 基本技术,156,酸类物质（如生长素类和脱落酸）和苯基脲类物质可用极少量的1mol.L-1 NaOH溶解 ， 蒸馏水定容 ，碱类物质（如腺嘌呤的衍生物细胞分裂素）可用数滴1mol.L-1的HCl或NaOH溶解（用NaOH溶解性更好） ， 蒸馏水定容 ，GA3用95酒精溶解及定容 ， 玉米素可先溶于少量95酒精中再加水定容 。

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标题：遗传学第2章|遗传学第2章 基本技术课件( 九 )