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遗传学第2章|遗传学第2章 基本技术课件( 七 )


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37、D和NAA则能延缓多酚合成 , 减轻褐变 。
,遗传学第2章 基本技术,104,()培养条件 事先对母株或枝条遮光处理后再取材接种 , 则褐变可以减轻 因为在酚类化合物合成和氧化过程中 , 有一部分酶系统活性是受光诱导的 。
采用暗培养或弱光照培养能够减轻褐变 。
较高的培养温度能加速培养物的褐变 例如 , 卡特兰在2530下培养 , 褐变物质渗出量大 , 而1520下的渗出量小 。
,遗传学第2章 基本技术,105,()每代的培养时间 代期过长 , 加剧褐变的发生 。
培养基对培养物的营养供给可能跟不上 , 有害物质(代谢垃圾)则可能越积越多 , 从而促进细胞的衰老甚至死亡,遗传学第2章 基本技术,106,、防止褐变的措施 ()选择适当的外 。

38、植体 ()母株和外植体的预处理 ()在培养基中添加抗氧化剂、防褐变剂或解毒剂 ()培养方式和培养条件,遗传学第2章 基本技术,107,()选择适当的外植体 选择褐变不严重、具有较强分生能力的外植体 , 使外植体保持旺盛的生长状态 。
顺利地实现细胞的脱分化和再分化 , 就能够最大限度地减轻褐变的发生 。
,遗传学第2章 基本技术,108,()母株和外植体的预处理 母株遮光或将母株栽植于温室内 外植体的预处理方式 如低温处理(5)、饥饿处理和热处理等 但最多用的是药剂处理 即在抗氧化剂或防褐变剂溶液中进行外植体切割、浸泡处理或预培养等 ,既减少伤口与氧的结合 , 又可抑制伤口附近组织的褐变反应 , 阻止褐变的发展,遗 。

39、传学第2章 基本技术,109,()在培养基中添加抗氧化剂、防褐变剂或解毒剂 通常使用的药剂有抗坏血酸、柠檬酸、半胱氨酸、二硫苏糖醇、聚乙烯吡咯烷酮(即PVP , 有可溶和不溶两种)、牛血清蛋白、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫脲、巯基乙醇、二乙基二硫代氨基甲酸钠(即DIECA , 俗称铜试剂)和氰化钾等,遗传学第2章 基本技术,110,这些药剂的防褐变机理有多个方面 包括吸收或吸附酚类底物(如PVP) 抑制多酚氧化酶活性(如DIECA) 影响底物与酶的结合(如巯基乙醇) 与酚类底物竞争活性氧抑制酶促褐变(如抗坏血酸) 创造酸性条件抑制酶促褐变(如柠檬酸)等 , 可酌情选用 。
,遗传学第2章 基本技术,111,活性 。

40、炭在离体培养中应用较多 作为一种强效的解毒剂 , 能够吸收已生成的褐变物质 , 降低其在外植体周围的浓度 但活性炭同时也会吸收生长激素等活性物质 , 降低其有效浓度,遗传学第2章 基本技术,112,()培养方式和培养条件 采用液体培养 , 外植体分泌的褐变物质能够很快扩散开来 对于悬浮培养而言 , 还可以通过不断添加或更换新鲜培养基 , 把褐变物质的浓度不断稀释,遗传学第2章 基本技术,113,对于固体培养 , 缩短继代周期 减少褐变物质在外植体附近的积累 此外 , 在比较理想的培养条件下(包括光照、温度、氧分压)进行培养 , 也会使褐变得到不同程度的遏制 。
,遗传学第2章 基本技术,114,第四节培养基及其配制,一、培养基的种类 。

41、及组成 有数十种之多; 分类: 1)固体培养基和液体培养基; 2)基本培养基和完全培养基,遗传学第2章 基本技术,115,基本培养基 只含有无机营养物(包括大量元素和微量元素)、维生素、氨基酸、碳水化合物和水 。
完全培养基 在基本培养基的基础上 , 附加一些物质 , 如各种植物生长调节剂:BA、ZT、KT、2-iP、2,4-D、NAA、IAA、IBA、GA等 , 以及其他的复杂有机附加物 ,包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物 , 如椰乳、香蕉汁、番茄汁、酵母提取物、麦芽膏等 。
,遗传学第2章 基本技术,116,基本培养基较常用的仅一二十种 如MS , 改良MS、MT、White、改良White、Nitsch、He 。

42、ller、N6、B5、ER、NT、WS等 ,它们在组份上存在或大或小的差别 。
,遗传学第2章 基本技术,117,无 机 盐 类,大量元素: 培养基的大量元素使用量一般在每升几十至几千毫克 。
大量元素包括C、H、O、N、P, K、Ca、Mg、 S 它们是植物细胞中构成核酸、蛋白质、酶系统、叶绿体以及生物膜所必不可少的元素 微量元素: 微量元素的用量一般低于10-510-7克分子浓度 。
植物所需的微量元素有Fe、Cu、Zn、B、 Mo、Mn、Co,遗传学第2章 基本技术,118,N通常为硝态氮或铵态氮 多以KNO3或Ca(NO3)2、NH4NO3的形式提供 , 或将硝态氮与铵态氮配合使用 为培养物的生长 。

43、提供营养 也是胚胎发生的必需条件 铵的含量超过8mmol.L-1时对培养物有毒害作用,遗传学第2章 基本技术,119,P是植物的必需元素之一 参与生命活动中核酸及蛋白质合成、光合作用、呼吸作用以及能量的贮存、转化与释放等重要的生理生化过程 K是主要的阳离子 , 近年来在培养基中的用量呈逐渐提高的趋势; Ca、Mg、S的用量相对少一些 , 浓度在13mmol.L-1范围内较适宜 。


来源:(未知)

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