14、定受体细胞相适应的复制位点或整合位点 。
2、载体的类型主要有哪些？在基因工程操作中如何选择载体？基因工程中常用的载体 （vector）主要包括质粒（Plasmid）、噬菌体（phage）和病毒（virus）三大类 。
这些载体均需经人工构建 ， 除去致病基因 ， 并赋予一些新的功能 ， 如有利于进行筛选的标志 基因、单一的限制酶切点等 。
3、A、质粒转化原理 ， 影响转化率的因素有哪些？化学法（CaCl2法）转化原理：是Ca2+与细菌外膜磷脂在低温下形成液晶结构 ， 后者经 热脉冲发生收缩作用 ， 使细胞膜出现空隙 ， 质粒或DNA重组分子便可进入细胞内（感受态细胞） 。
电穿孔转化转化原理：将待转化的质粒或DNA重组连接液加在电 。

15、穿孔转化仪的样品池中 ， 两极施加高压电场 ， 在强大电场的作用下 ， 细菌细胞壁和细胞膜产生缝隙 ， 质粒或 DNA重组分子便可进入细胞内 。
影响转化率的主要影响因素：载体本身的性质及其空间构象：超螺旋构象转化率最高;
插入片段的大小：插入片段越大 ， 转化效率越低； 受体细胞的类型及预处理； 转化方法：电击法高于化学法 。
1）2）3）4）4、PCR扩（自用已学过的重组体分子的选择与鉴定技术 ， 试设计一个试验方案 ， 假如一特异 出的基因或基因片断重组进 T载体并转化大肠杆菌 ， 如何鉴定并获得真实转化子?理）克隆基因的表达5、通过比较 ， 分析大肠杆菌表达系统和酵母表达系统各有何优缺点 。
大肠杆菌表达外源基因的优势：J全基因组测 。

16、序 ， 共有 4405个开放型阅读框架；【基因克隆表达系统成熟、完善；J繁殖迅速、培养简单、操作方便、遗传稳定；J被FDA批准为安全的基因工程受体生物 。
大肠杆菌表达外源基因的劣势：缺乏对真核生物蛋白质的复性功能；J缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统；J内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白；J周质内含有种类繁多的内毒素 。
甲醇酵母表达系统的优点：具有强的受严格调控的 AOX1启动子表达蛋白的翻译后的加工和修饰营养要求低 ， 工业化生产成本低可高密度发酵表达蛋白可存在于胞内和胞外酵母表达系统的缺点：酵母表达蛋白有时会出现蛋白切割问题（这个找不到 ， 百度的）6、如何提高克隆基因的表达水平？1 ）、2 ）、3 。

17、 ）、4 ）、表达载体的优化设计；提高目标基因 mRNA和目标基因产物的稳定性；密码子偏爱性； 表达环境条件的优化 。
7、克隆基因目的蛋白的表达的形式主要有哪些类型？表达蛋白按溶解特性通常包括： 不溶性蛋白和可溶性蛋白两类 ，具体包括如下几种结构形态： 包涵体型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白8启动子从转录模式上可分为哪两种？表达系统常选用哪一种？其机理是什么？启动子从转录模式上分为：组成型启动子和诱导型启动子表达系统常选用诱导型启动子机理：指在某些特定的物理或化学信号的刺激下 ， 该种类型的启动子可以大幅度地提高基因的转录水平 。
9、表达载体和基因工程一般克隆载体在元件构成上有何差别？表达载体：启动子； 。

18、终止子；核糖体结合位点（SD序列）；筛选标记；复制子（质粒拷贝数）； 多克隆位点克隆载体：筛选标记；复制子（质粒拷贝数）；多克隆位点10、根据表达蛋白用途的不同 ， 设计选择基因的表达策略 。
（1） 表达蛋白用于生物化学和分子生物学研究一一主要考虑保持蛋白质原有的功能不变； 表达策略：融合表达和直接表达（2）表达蛋白用作抗原 一一主要考虑表达蛋白的快速提纯；表达策略：以包涵体形式合成 目的蛋白和融合表达目标蛋白（不用去除标签蛋白）（3 ）表达蛋白用作结构研究 一一表达蛋白以天然可溶形式产生；表达时考虑因素：表达温 度（高温促进包涵体的形成）；表达水平（高表达促成包涵体的形成）；表达载体受体菌 。
第五章 。

19、 基因的克隆一般方法3种 ， 书上找）？1基因的克隆方法主要有哪些？并阐述其克隆原理（至少2、重组体分子的选择方法主要有哪些？并简单阐述其原理 。
从总体上看 ， 重组体分子的选择与鉴定方法基本上可以分为如下几个类型：（1）基于载体遗传标记检测法在构建基因工程载体系统时 ， 载体DNA分子上通常携带了一定的选择性遗传标记基因 ， 转据此可进行转化子或重组化或转染宿主细胞后可以使后者呈现出特殊的表型或遗传学特性 ，子的初步筛选 。

来源：(未知)

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标题：基因工程|基因工程章节复习题资料( 三 )