（2 ）基于克隆DNA序列检测法DNA片段转移并结合DNASouthern印迹杂交：根据毛细管作用的原理 ， 使在电泳凝胶中分离的在适当的滤膜上 ， 然后通过与已标记的单链 DNA探针的杂交作用以检 。

20、测这些被转移的 片段 。
（3）基于外源基因产物检测法如果目的基因产物能降解某些药物使菌株呈现出抗性标记 ， 或者基因产物与某些药物作用是显颜色反应 ， 则可根据抗性或颜色直接筛选含目的基因的克隆子 。
3. 基因组文库的构建过程？如何确定文库的大小?基因组文库的构建过程：1) 从生物体提取大片断的基因组DNA ；2) 用适当的限制性内切酶 (常为4碱基识别位点)进行部分酶切或超声波打断基因组DNA ；DNA片断(根据载体的要求)在琼脂凝胶电泳上或蔗糖梯度离心筛选适当长度的 载体的酶切、回收；将处理好的基因组 DNA片断与载体连接； 将重组子导入宿主细胞文库的鉴定、收集、保存；3)4)5)6)7)确定文库大小 。

21、的方法：它与基因文库最以在构建的基因组文库中任一基因存在的概率来衡量文库的质量或完备性 ，低所含克隆数N (即文库大小)之间的关系可用下式表示：N = In ( 1 -P)/ln( 1 -f)其中：N :文库所需的总克隆数；P:任一基因被克隆(或存在于基因文库中)的概率； f:克隆片段的平均大小/生物基因组的大小 。
4. 基因文库的类型包括哪两种？各有什么特点？A .酵母双杂交技术原理：大部分真核生物的位点特异转录激活因子通常具有两个可分隔开的结构域 ， 一个是 DNA 特异结合域( DNA-binging domain,BD ), 一个是转录激活域 (transcrip tio nal activ 。

22、ation domai n, AD) 。
这两个结构域各具功能 ， 互不影响 ， 但一个完整的、 具有激活特定基因表达的激活因子必须同时含有这两个结构域 ， 否则无法完成其激活功能 。
不同来源的激活因子的 BD区与AD区结合后则能特异地激活BD结合基因的表达 。
第六章基因功能研究技术1. MicroRNA , SiRNA 的区别：2. 转录因子圈套原理3. 基因敲除的原理4. Ch IP酵母双杂交技术的原理5. 人工核酸酶介导的定点突变技术的种类？ZFN, TALEN, CRIS PA-CAS9第七章动植物基因工程1、什么叫转基因植物？植物转基因技术的基本路线主要包括哪些？利用DNA重组技术 ， 在离体条件下对不同生 。

【基因工程|基因工程章节复习题资料】23、物的DNA进行加工 ， 并按照人们的意愿和适当的载体重新组合 ， 再将重组DNA转入生物体或细胞内 ， 并使其在生物体内或细胞中表达的植物 。
植物转基因技术的基本路线分离目的基因目的基因与恰当的载体 DNA形成重组DNA重组DNA的扩增目的基因导入到受体细胞筛选转化细胞 ， 诱导产生转基因植株转基因植株的大规模种植2、外源基因导入植物的方法主要有哪些？物理方法：电击法、基因枪法（biolistic）、显微注射法、微激光束法化学方法：PEG介导法、脂质体介导法生物学方法：农杆菌介导法、花粉管通道法运用已学的知识 ， 如何全面分析获得的转基因个体（提示：包括外源基因是否整合 ， 被 插入位点分析 ， 外源基因是否表达 ， 表达量如何？等） 对转基因个体进行检测与鉴定的对象报告基因 目的基因（1）基因组水平的检测与鉴定（外源基因是否整合 ， 被插入位点分析）合 Southern Blotting 进行验证 。
（2）基因的转录/表达水平的检测与鉴定（外源基因是否表达）:可用Blotting 。
基因的翻译水平的检测与鉴定（表达量）：可用Western Blotting 来讲 ， 还可以利用报告基因的显色或发光特性进行选择与鉴定3、:可以用PCR扩增结RT-PCR 法或者 Northern或者ELISA。
对报告基因 。

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标题：基因工程|基因工程章节复习题资料( 四 )