7、加蒸馏水溶解并定容至100 mL， 在室温下可保存数月 。
2. 9 %苯酚溶液：取 3 mL 90 %苯酚溶液 ， 加蒸馏水至30 mL， 现配现用 。
3. 浓硫酸（比重1.84） 。
4. 1 %蔗糖标准液：将分析纯蔗糖在80 C下烘至恒重 ， 精确称取1.000 g ， 加少量水溶解 ， 移入100 mL容量瓶中 ， 加入 0.5 mL 浓硫酸 ， 用蒸馏水定容至刻度 。
5. 100卩g/L蔗糖标准液：精确吸取1 %蔗糖标准液丨mL 加入100 mL容量瓶中 ， 加蒸馏水定容 。
（三）仪器设备分光光度计 ， 电炉 ， 铝锅 ， 20 mL刻度试管 ， 刻度吸管 5 mL 1 支、丨mL 2 支 ， 记号笔 ， 吸水纸适量 。
三、实验步骤1 标准曲线的制作 。

8、取20 mL刻度试管11支 ， 从010分别编号 ， 按表 24-2加入 溶液和水 ， 然后按顺序向试管内加入1mL 9 %苯酚溶液 ， 摇匀 ， 再从管液正面以 520 s时间加入5 mL浓硫酸 ， 摇匀 。
比色液总体积为8 mL， 在室温下放置 30 min， 显色 。
然后以空白为参比 ， 在 485 nm 波长下比色测定 ， 以糖含量为横坐标 ， 光密度为纵坐标 ， 绘制标准曲 线 ， 求出标准直线方程 。
表24-2苯酚法测可溶性糖绘制标准曲线的试剂量试剂管号01、23、45、67、89、10100卩g/L蔗糖标准液（mL ）00.20.40.60.81.0蒸馏水（mL ）2.01.81.61.41.21.0蔗糖量（卩g ）020406 。

9、0801002 可溶性糖的提取 取新鲜植物叶片 ， 擦净表面污物 ， 剪碎混匀 ， 称取0.10.3 g, 共3份 ， 分别放入3支刻度试管中 ， 加入 510 mL蒸馏水 ， 塑料薄膜封口 ， 于沸水中提取30min （提取2次） ， 提取液过滤入 25 mL容量瓶中 ， 反复冲洗试管及残渣 ， 定容至刻度 。
3 测定吸取0.5 mL样品液于试管中（重复 2次） ， 加蒸馏水1.5 mL， 同制作标准曲线的步骤 ， 按顺序分别加入苯酚、浓硫酸溶液 ， 显色并测定光密度 。
由标准线性方程求岀糖的量 ， 计算测试样品中糖含量 。
四、结果计算可溶性糖含量（）=式中：C 标准方程求得糖量,V T提取液体积 ， mLV 1吸取样品液体积 ， mLW组织重量 ，g皿3，。

10、5 -二硝基水杨酸比色法测定还原糖、原理3 , 5 -二硝基水杨酸溶液与还原糖（各种单糖和麦芽糖）溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物 ， 在一定范围内 ， 还原糖的量和棕红色物的颜色深浅的程度成一定比例关系 。
在540nm波长下测定棕红色物质的消光度值 ， 查标准曲线 ， 便可求岀样品中还原糖的含量 。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料食用面粉 。
（二）试剂1. 1 mg/mL 葡萄糖标准液：准确称取 100 mg分析纯葡萄糖（预先在 80 C烘干至恒重） ， 置于小烧杯中 ， 用少量蒸馏水溶解后 ， 定量转移到100mL的容量瓶中 ， 以蒸馏水定容至刻度 ， 摇匀 ， 置冰箱中保存备用 。
2. 3,5 -二硝基水杨酸试剂：3,5 。

11、 -二硝基水杨酸 6.3 g ，2 mol/L 的NaOH溶液262 mL ， 加到500 mL含有185 g 酒石酸钾钠的热水溶液中 ， 再加5 g 结晶酚和5 g 亚硫酸钠 ， 搅拌溶解 。
冷却后加蒸馏水定容至1000 mL， 贮于棕色瓶中备用 。
（三）仪器设备离心机 ， 电子天平 ， 分光光度计 ， 大离心管或玻璃漏斗 ， 100 mL烧杯 ， 100 mL三角瓶 ， 刻度试管 ， 刻度吸管 1、2、10 mL， 沸水浴 ， 容量瓶 。
三、实验步骤1. 制作葡萄糖标准曲线取7支具有25 mL刻度的刻度试管 ， 编号 ， 按表24 - 3所示的量 ， 精确加入浓度为1 mg/mL的葡萄糖标准液和 3,5-二硝基水杨酸试剂 。
表24-3绘制葡萄糖标准曲线 。

12、的试剂量试剂管号01234561 mg/mL葡萄糖标准液（ mL ）00.20.40.60.81.01.2蒸馏水（mL ）2.01.81.61.41.21.00.83,5 -二硝基水杨酸试剂（mL ）1.51.51.51.51.51.51.5相当于葡萄糖量（mg ）00.20.40.60.81.01.2将各管摇匀 ， 在沸水浴中加热5 min， 取岀后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温 ， 再以蒸馏水定容至25 mL刻度处 ， 用橡皮塞塞住管口 ， 颠倒混匀（如用大试管 ， 则向每管加入21.5mL蒸馏水 ， 混匀） 。
在 540 nm波长下 ， 用0号管调零 ， 分别读取 16号管的消光值 。
以消光值为纵坐标 ， 葡萄糖毫克数为 。

13、横坐标 ， 绘制标准曲线 ， 求得直线方程 。
2. 样品中还原糖的测定（1 ）样品中还原糖的提取准确称取3 g 食用面粉 ， 放在100 mL的烧杯中 ， 先以少量蒸馏水调成糊状 ， 然后加 50 mL蒸馏水 ， 搅匀 ， 置于 50 C恒温水浴中保温 20 min， 使还原 糖浸出 。
离心或过滤 ， 用20 mL蒸馏水洗残渣 ， 再离心或过滤 ， 将两次离心的上清液或滤液全部收集在100 mL 的容量瓶中 ， 用蒸馏水定容至刻度 ， 混匀 ， 作为还原糖待测液 。

来源：(未知)

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标题：可溶性|可溶性糖测量方法( 二 )