9、培养基放于20-25孵室 ， 另一半硫盐及肝斜面培养基放于30-35 孵室 ， 至少再等10-11天后才能判定结果；1.8不含防腐剂的制品（如卡舒宁）直接接种在硫盐、肝斜面、改良马丁培养基中 ， 一半硫盐及肝斜面培养基放于30-35孵室 ， 剩余的全部放于20-25孵室 ， 至少14天后才能判定结果 。
2结果2.1小瓶乙脑疫苗用两种无菌试验方法的初试比较对小瓶乙脑疫苗13批共50个瓶号用全封闭式集菌培养法和直接接种法进行初试 ， 结果表明用全封闭式集菌培养法全部合格 ， 初试合格率100% ， 复试率为O% 。
用直接接种法有46个瓶号合格 ， 4个瓶号复试 ， 初试合格率92% ， 复试率8% 。
见表l 。
表1 小瓶乙脑疫苗13批50个瓶号初试 。

10、情况批号（瓶号）全封闭式集菌培养法直接接种法XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格1#、2#合格；3#、4#复试*XXXX(1-4#)合格1#、2#合格；3#、4#复试*XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-2#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格XXXX(1-4#)合格合格复试率（初试合格率）0（100%）8%（92%）*表示这4个瓶号再用直接接种法复试后全部合格 。
2.2卡舒宁用两种无菌试验方法的初试比较对 。

11、卡舒宁6个瓶号用全封闭式集菌培养法和直接接种法进行初试 ， 结果表明用全封闭式集菌培养法初试合格率100% ， 复试率为0 。
用直接接种法初试合格率为0 ， 复试率100% 。
见表2 。
表2卡舒宁6个瓶号初试情况瓶号全封闭式集菌培养法直接接种法1#合格复试*2#合格复试*3#合格复试*4#合格复试*5#合格复试*6#合格复试*复试率（初试合格率）0（100%）100%（0%）*用直接接种法复试 ，1#、2#、3#、5#、6#合格 ， 而4#复试不合格 。
其实这个不合格瓶号在48支培养基中仅有1支改良马丁染菌而判为不合格 。
用直接接种法初试合格率为0 ， 而复试合格率是83% 。
像这种情况 ， 重复性极其不好 ， 以后用全封闭式集菌培 。

12、养法可以避免类似情况 。
2.3安瓿乙脑用两种无菌试验方法的复试比较对于含防腐剂制品染菌情况的 ， 用全封闭式集菌培养法是否存在抑菌 ， 我们对5批安瓿乙脑共12个瓶号（初试用直接接种法染菌的）进行复试 。
结果表明 ， 用全封闭式集菌培养法有6个瓶号复试不合格 ， 复试不合格率50% ， 直接接种法有9个瓶号复试不合格 ， 复试不合格率为75% 。
还可知有5个瓶号用这两种方法都出现染菌现象 ， 见表3 。
表3安瓿乙脑5批12个6个瓶号的复试情况批号全封闭式集菌培养法直接接种法XXXX(2# ， 4# ， 11#)11#复试不合格 ， 2# ， 4#复试合格2# ， 4# ， 11#复试不合格XXXX(7# ， 8#)7#复试不合格 ， 8#复试合格7# ， 8#复试 。

13、不合格XXXX1# ， 6# ， 7#)1#复试不合格 ， 6# ， 7#复试合格6#复试不合格 ， 1# ， 7#复试合格XXXX(2# ， 3# ， 5#)2#、5#复试不合格 ， 3#复试合格2#、5#复试不合格 ， 3#复试合格XXXX(2#)2#复试不合格2#复试不合格复试不合格率50%75%表3结果说明有菌的用全封闭式集菌培养法一样会出现染菌现象 ， 不存在抑菌情况 ， 而且复试不台格率低于用直接接种法 。
3讨论历来 ， 怎样降低无菌试验复试率一直是无菌试验检定最关心的焦点 ， 虽然染菌与其它环节有关系 ， 但用全封闭式集菌培养法降低复试率无疑是一种优选的方法 。
因为直接接种法操作环节较多 ， 易造成操作过程中再污染 ， 比如：注射器灭菌处理未彻底：培 。

14、养基接种中管支数太多（初试24支 ， 复试48支）暴露在外的培养基塞子只要有一支未控制好就会有菌掉入培养基中出现染菌：准备工作繁琐 ， 若有一支染菌培养基未发现被选用；平时观察较困难 ， 培养基搬来搬去 ， 塞子易松易掉而掉人外界菌 ， 还有由克氏瓶转接中的过程等 。
而全封闭式集菌培养法在很大程度上克服了这些 ， 把外界影响和操作者的主观因素减少到最低 ， 又增加了取样量 ， 较直接接种法更为客观、公正、科学 ， 能够全面反映样品的染菌情况 。
该法是药学领域中用作无菌培养的成熟技术 ， 常用来作注射剂的无菌检查4 ， 并被收入2010 年版中国药典5 。
其优点是可对样品全量过滤集菌 ， 整个过程在封闭状态下进行 ， 操作不易污染 ， 重复性好 。
全封闭式集 。

【封闭式|全封闭式集菌培养法与直接接种法的无菌试验比较】15、菌培养法只用2种培养基 ， 没有肝斜面 。

稿源：(未知)

【傻大方】网址：/a/2021/0707/0022751619.html

标题：封闭式|全封闭式集菌培养法与直接接种法的无菌试验比较( 二 )