控制时间：Lowry反应的显色随时间不断加深 ， 因此各项操作必须精确控制时间 。
严格按照实验步骤的操作 ， 规定的时间是多少就多少 。
水浴时间也不宜过长 。
同时, 在最后从水浴加热后取出冷却后 ， 需及时的进行比色测定 。
防止混合液中物质发生系列 变化和反应 。
加入Foli 。

8、n-酚试剂后 ， 需要马上混合摇匀 ， 防止磷钼酸-磷钨酸试剂被破坏 。
干扰物质的影响：凡干扰双缩脲反应的基团 ， 均可干扰Folin-酚反应 。
这些物质在所测样品中含量较高时 ， 则需做校正曲线 。
若所测的样品中含硫酸铵 ， 则需增加碳酸钠一氢氧化钠浓度即可显色测定 。
若样品酸度较高 ， 也需提高碳酸钠一氢氧化钠浓 度1 2倍 ， 这样即可纠正显色后色浅的弊病 。
绘制曲线要求：作过原点的直线或光滑连续的曲线 ， 该线表示实验点的平均 变动情况 ， 因此该线不需全部通过各点 ， 但应尽量使未经过线上的实验点均匀分布在曲 线或直线两侧 。
（电脑Excel绘图 ， 可以不考虑） 操作要按照实验步骤 ， 一步一步来 ， 防止操作问题导致的操作误差的出现等 。
二 。

9、、实验记录2.1实验条件材料及试剂：本次实验的试剂和材料均是实验室配制好的 ， 比例和浓度同实验预习 ，故不再赘述 。
实验时间表：总表实验步骤消耗时间混合溶液未计时滴加溶液静置10mi n加Folin-酚试剂、水浴10mi n室温冷却27min等待20min比色测定6min附表项目时刻表试管1试管2试管3试管4试管5试管6加硫酸铜8 42” 098 43” 208 44” 298 45” 458 46” 558 47” 55水浴8 52” 098 53” 208 54” 298 55” 458 56” 558 57” 55冷却等待9 02” 099 03” 229 04” 299 05” 459 0 。

10、6” 559 08” 00操作技巧： 在这一次的实验中 ， 关键的要点在于滴加 Folin-酚试剂的摇匀 ， 必须快速摇匀 ，保证反应优先进行 。
振荡试管时 ， 振荡的正确方法是用手腕的力左右摆动 ， 使试管中液 体混合均匀且不漏出 。
最后放入到水浴中加热 。
在分光比色的时候 ， 测量一次后重新凋零 ， 不能继续测量等 。
操作失误：全部实验过程中 ， 就出现了一次失误 ， 即在试管 4加入Folin-酚试剂 ， 充分摇匀 ， 在放 入水浴加热之间 ， 部分液体由于磕碰而溅出 。
其余操作严格按照要求一步步完成 ， 理论 不存在着失误 。
分析：Folin-酚与液体已经混合均匀并反应 ， 在后面的水浴加热后 ， 只是影响到了 整体的试管4的反应后得到的溶液量 ， 而不 。

11、影响颜色的变化及最后的比色测定 ， 故该失 误不会对实验产生测定的偏差 。
2.2实验现象 在滴加硫酸铜溶液后 ， 摇匀 ， 产生较多的黏性气泡且附着在液体表面 。
液体颜色 变化不深 。
在滴加Folin-酚试剂水浴加热后 ， 除试管1为淡黄色外 ， 其余试管均成不同的蓝 色 。
具体看下图：图一水浴后各试管的情况图分析：标准液的试管中（2-5）蓝色不断加深 ， 同实际的标准液的含量多少正相关 ，而试管6的颜色不深 ， 在1-2试管之间 ， 根据实验原理初步可以判定的是：该样品液的 蛋白质含量将不会在60-80g/L之间 ， 而是在0-40g/L 。
即实验存在一定的问题 ， 详见结 果的分析与讨论 。
2.3实验原始数据本次实验原始数据是在500nm 。

12、的波长下 ， 各试管混合液的吸光度值 ， 结果见下表1表1 500nm波长吸光度值记录测定次数各管吸光度值A5002345610.3530.5610.7440.9380.1722 0.3500.5620.7440.9380.1723 0.3510.5620.7430.9380.172各管平均值A 500三、结果与讨论3.1数据处理3.1.1利用原始数据 ， 可得到各管的平均值：2 管：A 500=( 0.353+0.350+0.351)/3=0.3513 ；3 管：A 500=( 0.561+0.562+0.562)/3=0.5617 ；依次得到4-6管的吸光度值如下所示:测定次数各管吸光度值A50023 。

13、456各管平均值A 5000.35130.56170.74370.93800.17203.1.2 Excel绘制蛋白质的标准曲线根据用Excel绘制标准曲线PPt所示步骤 ， 最终得到如下结果:牛血清清蛋白浓度吸光度标准曲线图2标准曲线图2从图中我们可以看到线性方程：y 0.0062?x , R 0.9659将样品溶液的吸光度（即y值）代入方程 ， 可得出样品浓度（即x值）；由相关指数值R2 可看出误差大小 。
y 0.1720 x 0.1720 0.0062 27.74 g/mL血清蛋白浓度（g/ml）= 样品蛋白质浓度x 2X 300故得血清蛋白浓度为16.65g/L 。
3.2结果由上数据处理可知 ， 最后 。

14、的待测样品的蛋白质含量为16.65g/L 。
而真正的正常人血 清蛋白浓度范围为6080 g/L 。
因此 ， 存在一定问题 ， 具体分析见 3.3分析与讨论 。

稿源：(未知)

【傻大方】网址：/a/2021/0801/0023374162.html

标题：蛋白质|蛋白质的定量测定试验报告( 二 )