1、疫组化基本技术课件 免疫组化基本技术（一）免疫组化基本技术（一） 疫组化基本技术课件 RCA法 IGSS IS-PCR CSA法 UIP Envision LSAB法 双PAP法 PAP法 ABCABC法法 桥法 间接法 直接法 疫组化基本技术课件 第一部分第一部分 组织与细胞材料的制备组织与细胞材料的制备 疫组化基本技术课件 内容：组织与细胞材料内容：组织与细胞材料 的取材和保存的取材和保存 疫组化基本技术课件 主要内容主要内容 一、人体组织标本的取材一、人体组织标本的取材 二、动物组织标本的取材二、动物组织标本的取材 三、取材注意事项三、取材注意事项 四、细胞标本的准备四、细胞标本的准备。

2、五、组织的固定、脱水、透明和包埋五、组织的固定、脱水、透明和包埋 六、切片六、切片 七、组织与细胞材料的保存七、组织与细胞材料的保存 疫组化基本技术课件 概概 述述 免疫组织化学（免疫组织化学（Immunohistochemistry;
IHC） 技术是一门综合性技术 ， 除了具备技术是一门综合性技术 ， 除了具备 优质、高效 ， 特异的一抗 ， 敏感的检测方法 ， 优质、高效 ， 特异的一抗 ， 敏感的检测方法 ，稳定的显示系统外 ， 还需要掌握组织标本或稳定的显示系统外 ， 还需要掌握组织标本或 标本的取材、固定、包埋、切片 ， 以及标本的取材、固定、包埋、切片 ， 以及IHC 前的处理 ， 内源性酶的消除方法 ， 非特异背前的处理 ， 内源性 。

3、酶的消除方法 ， 非特异背 景的消除方法 ， 怎样防止景的消除方法 ， 怎样防止IHC染色过程中的染色过程中的 脱片 。
脱片 。
疫组化基本技术课件 一、人体组织标本的取材一、人体组织标本的取材 手术切除标本 ， 各种活检穿刺手术切除标本 ， 各种活检穿刺 标本和尸体解剖标本 。
标本和尸体解剖标本 。
疫组化基本技术课件 1.1.手术切除标本的取材：手术切除标本的取材： 抗原在组织中的分布常不均一 ， 取材抗原在组织中的分布常不均一 ， 取材 时应考虑：主要病灶 ， 病灶与正常组织交时应考虑：主要病灶 ， 病灶与正常组织交 界处 ， 远离病灶的正常组织 。
界处 ， 远离病灶的正常组织 。
组织大小：组织大小：长长1cm宽宽1cm厚厚0.20.3cm 。

4、 。
疫组化基本技术课件 2.2.各种小组织的活检取材：各种小组织的活检取材： 它不仅体积小 ， 取材困难 ， 不易取到它不仅体积小 ， 取材困难 ， 不易取到 主要病灶 ， 因此对标本的处理应特别慎重 ， 主要病灶 ， 因此对标本的处理应特别慎重 ，及时固定 ， 包埋时要平整 。
及时固定 ， 包埋时要平整 。
疫组化基本技术课件 3.3.穿刺标本的取材：穿刺标本的取材： 光镜（光镜（HEHE、特殊染色、特殊染色、IHCIHC、ISHISH） 电镜（透射电镜、免疫电镜）电镜（透射电镜、免疫电镜） 疫组化基本技术课件 4.4.尸检组织的取材尸检组织的取材 病人死亡后 ， 一般要在数小时后才能病人死亡后 ， 一般要在数小时后才能 做尸检 ， 因此 ， 及 。

5、时取材 ， 尽早固定是开做尸检 ， 因此 ， 及时取材 ， 尽早固定是开 展展IHC检测的关键 。
检测的关键 。
疫组化基本技术课件 二、动物组织标本的取材二、动物组织标本的取材 动物的处死方式一般为活杀 ， 组织标动物的处死方式一般为活杀 ， 组织标 本来源较新鲜 ， 本来源较新鲜 ， 10min内即可完成固定和冷内即可完成固定和冷 冻保存 ， 脑组织和神经组织应采用灌注固冻保存 ， 脑组织和神经组织应采用灌注固 定后 ， 再进行后固定 。
定后 ， 再进行后固定 。
疫组化基本技术课件 动物处死方法：动物处死方法： 1.麻醉法麻醉法 乙醚或乙醚或4戊巴比妥静注戊巴比妥静注 2.空气栓塞法空气栓塞法 3.断头法断头法 4.击头法击头法 5.股动脉放 。

6、血法股动脉放血法 疫组化基本技术课件 三、组织取材注意事项三、组织取材注意事项 1.组织要求离体后组织要求离体后30min内浸入固定液 ， 内浸入固定液 ，尤其是开展分子生物学工作 。
动物组织取尤其是开展分子生物学工作 。
动物组织取 材要求心脏还在跳动时取材 。
材要求心脏还在跳动时取材 。
疫组化基本技术课件 2.注意防止人为因素的影响注意防止人为因素的影响 刀和剪要快 ， 刀要足够长 。
刀和剪要快 ， 刀要足够长 。
3.组织块的大小组织块的大小 厚为厚为0.10.10.3cm0.3cm ， 大小可根据需要而定 ， 大小可根据需要而定 4.动物和人体组织的取材位置动物和人体组织的取材位置 要视研究目的 ， 观察部位而定要视研究 。

稿源：(未知)

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标题：疫组化|疫组化基本技术课件