1、苦瓜藤多糖提取流程探析作者：曾哲灵 奚光兴 葛晓环 单位：南昌大学食品科学与技术国家重点实验室 南昌大学环境与化学工程学院 南昌大学生命科学与食品工程学院 1材料与方法 1.1材料与仪器苦瓜藤购自农村；牛血清蛋白购自美国Sigma公司；葡萄糖、考马斯亮蓝G-250、磷酸、苯酚、浓硫酸、盐酸溶液、氢氧化钠、无水乙醇等试剂皆为国产分析纯 。
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2、.1苦瓜藤多糖的提取工艺流程新鲜的苦瓜藤晒干后 ， 剪成23cm的小段 ， 粉碎机粉碎 ， 60条件下烘干至无游离水 ， 取一定量的苦瓜藤藤粉末 ， 按一定条件超声波提取后 ， 离心取上清液 ， 过滤 ， 50真空旋转浓缩提取液 ， 加入4倍体积的无水乙醇 ， 4下醇沉812h ， 醇沉两次 ， 离心 ， 乙醚洗涤 ， 烘干 ， 得苦瓜藤粗多糖 。
1.2.2葡萄糖标准曲线的制备14-15准确称取105烘至恒重的葡萄糖标品1g ， 蒸馏水定容至1L ， 移取2mL ， 用25mL的容量瓶定容 ， 得0.08mg/mL葡萄糖标液 。
分别吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL葡萄糖标液于25mL比色管中 ， 补足蒸馏水至2.0mL ， 加1.0 。

3、mL6%苯酚 ， 再加入5.0mL浓硫酸 ， 摇匀 ， 静置冷却至室温 ， 在490nm处测定吸光度值 。
以葡萄糖浓度为横坐标 ， 吸光度值为纵坐标 ， 绘制葡萄糖标准曲线 。
葡萄糖含量与吸光度值经回归处理 ， 回归方程为：A=14.373C-0.0133 ， R2=0.9969(n=8),糖含量在864μ
g线性良好 ， 见图1 。
1.2.3苦瓜藤多糖得率的测定16取提取液上清液 ， 过滤 ， 定容至250mL ， 分别吸取0.1mL提取液 ， 补足水至2.0mL,测定吸光度值 ， 根据测得的吸光度值A ， 参照葡萄糖标准曲线 ， 计算出多糖浓度 ， 进而得到得率 。
1.2.4超声波提取单因素实验 1.2.4.1提取温度准确称取5.0g苦瓜藤粉末5份 ， 料液比 。

4、为1:40(g/mL) ， pH为7 ， 分别取30、40、50、60、70 ， 超声提取20min ， 离心取上清液 ， 过滤 ， 计算多糖得率 ， 每个因素做四个平行 。
1.2.4.2料液比准确称取5.0g苦瓜藤粉末5份 ， 温度为60 ， pH为7 ， 料液比分别为1:20、1:30、1:40、1:50、1:60(g/mL) ， 超声20min ， 余下操作如1.2.4.1 。
1.2.4.3提取时间准确称取5.0g苦瓜藤粉末5份 ， 温度为60、料液比1:30(g/mL) ， pH为7 ， 分别超声10、20、30、40、50min ， 之后操作如1.2.4.1 。
1.2.4.4pH准确称取5.0g苦瓜藤粉末5份 ， 温度60、料液比1:30(g/mL) 。

5、、超声时间30min ， 研究不同pH条件3、5、7、9、11下的多糖提取得率 ， 余下操作如1.2.4.1 。
1.2.5苦瓜藤多糖超声波提取的正交实验设计17在单因素实验的基础上进行L9(34)正交实验 ， 因素水平表见表1 。
1.2.6热水提取法单因素实验设计热水提取法单因素实验 ， 并优化工艺 ， 比较分析两种提取方法的优劣 。
以料液比、提取时间、提取温度这3个单因素为研究目标 。
1.2.6.1料液比准确称取5.0g苦瓜藤粉末5份 ， 温度70 ， 料液比分别为1:20、1:30、1:40、1:50、1:60(g/mL) ， 热水提取90min ， 之后操作如1.2.4.1 。
1.2.6.2时间准确称取5.0g苦瓜藤粉末5份 。

6、 ， 温度70、料液比1:50(g/mL) ， 分别浸提30、60、90、120、150min ， 之后操作如1.2.4.1 。
1.2.6.3温度准确称取5.0g苦瓜藤粉末5份 ， 料液比1:50(g/mL)、浸提时间90min ， 分别在50、60、70、80、90条件下提取 ， 之后操作如1.2.4.1 。
1.2.7苦瓜藤多糖热水提取的正交实验设计根据单因素实验结果 ， 设计L9(33)正交实验 ， 因素水平表见表2 。
1.2.8超声波提取法与热水提取法的比较分别取5.0g苦瓜藤粉末2份 ， 分别用超声波与热水提取的最佳工艺各提取2次 ， 测定其多糖浓度 ， 得出多糖得率 ， 比较两种方法的提取效率 。
1.3统计分析各组实验数据平行4次 。

7、 ， 结果以平均值±
标准偏差的形式表示 。
数据采用GraphPadPrism（5.01版）进行分析 ， 结果显示单因素数据的p值超声时间pH料液比 。
其最佳提取工艺参数为A3B3C3D3 ， 但由于pH和料液比为次要因素 ， 为节约成本考虑 ， 调整pH为7 ， 料液比为1:30(g/mL) ， 其组合为A3B2C3D2 。
与A3B3C3D3做验证性比较 ， 结果表明 ， A3B2C3D2的得率为2.36% ， A3B3C3D3得率为2.38% ， 而表中A3B1C3D2的得率为2.35% 。
由此可见 ， 从提取率和能源节约两方面综合考虑 ， A3B1C3D2可为最优提取工艺 。

稿源：(未知)

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标题：瓜藤|苦瓜藤多糖提取流程探析