11、盐水（正常对照组）,注射后迅速使动物直立并轻轻旋转 ， 使药液在肺内均匀分布 ， 缝合伤口 ， 消毒 ， 待动物清醒后常规饲养. 建模后第2日各组动物进行治疗. 所有实验动物每只灌胃量均为1 mL. 分别于造模后7, 14 d分2批腹主动脉放血处死各组动物 ， 迅速取肺 ， 左叶肺制成组织匀浆进行生化检测 ， 右叶肺投入40 g/L甲醛中固定 ， 常规包埋 ， 切片 ， 进行HE染色 ， 光学显微镜下观察. 组织病理学参照文献3的方法 ， 确定肺泡炎（HE染色）的程度,进行病理半定量分析. SOD, MDA, GSH测定均参照试剂盒说明进行. TNF测定采用ELISA方法. 统计学处理: 计量数据均用xs表示 ， 采用SPSS11.0统计分析软 。

12、件进行处理. 多组间比较及两两比较采用方差分析以及LSDt检验. 病理半定量结果多组间比较用KruskalWallis秩和检验 ， 组间两两比较用MannWhitney U检验,此时校正检验水准为0.01 ， 即P0.01认为两两组间差异有统计学意义. 2结果 2.1光镜下肺组织病理学的改变建模后第7日 ， 模型组可观察到肺泡间隔水肿、出血、慢性炎性细胞浸润 ， 可见浆细胞及少量的成纤维细胞 ， 肺泡壁增厚 ， 病变区肺泡结构破坏 ， 大多呈23级肺泡炎改变；肺宁及强的松组肺泡炎显著减轻 ， 多呈12级肺泡炎改变. 第14日 ， 模型组肺泡间隔炎症细胞浸润程度严重 ， 单核细胞及成纤维细胞较前增多且有毛细血管的增生 ， 病变区肺泡结构破 。

13、坏 ， 肺泡腔消失 ， 周围区域肺泡变大 ， 肺泡隔变薄或断裂 ， 大多呈3级肺泡炎改变. 肺宁各治疗组肺泡炎程度较博莱霉素对照组显著减轻 ， 多呈02级肺泡炎改变. 强的松组肺泡隔增宽 ， 间质水肿明显 ， 部分大鼠肺部可见灶性脓肿 ， 多呈12级肺泡炎改变. 正常对照组肺结构正常 （表1,图1）.表1实验小鼠肺泡炎等级分析(n=6)A：正常对照组；B：模型组；C：肺宁治疗组；D：强的松治疗组. 图1 光镜下肺组织病理学改变HE 10 2.2肺组织匀浆SOD含量的变化建模后第7日 ， 模型组SOD活性低于正常对照组（P0.05）；肺宁各剂量组、强的松组SOD活力低于正常对照组（P0.05） ， 较模型组略低但无显著差异. 14 d 。

14、模型组SOD活性仍低于正常对照组（P0.05） ， 肺宁各剂量组、强的松组SOD活力都高于模型组（P0.05） ， 与正常组相比无显著差异；肺宁各组之间均无显著性差异 （表2）. 表2实验大鼠7 d和14 d肺组织匀浆SOD活性,MDA, GSH, TNF-含量 2.3肺组织匀浆GSH含量的变化建模后第7日, 模型组GSH含量低于正常对照组（P0.05）；肺宁高剂量组、强的松组GSH含量高于模型组（P0.05） ， 也高于正常对照组（P0.05）；肺宁高剂量组GSH含量高于强的松组（P0.05） ， 也高于肺宁中、低剂量组（P0.05）. 第14日 ， 模型组GSH含量低于正常对照组（P0.05）；肺宁各剂量组和 。

15、强的松组GSH含量均高于模型组（P0.05） ， 也高于正常对照组（P0.05 ， 表2）. 2.4肺组织匀浆MDA含量的变化建模后第7日 ， 模型组MDA含量高于正常对照组（P0.05）；肺宁各剂量组MDA含量低于模型组（P0.05）；肺宁中、低剂量组MDA含量低于强的松组（P0.05）. 第14日 ， 模型组MDA含量仍高于正常对照组（P0.05） ， 肺宁各剂量组及强的松组MDA含量都低于模型组（P0.05 ， 表2）. 2.5肺组织匀浆TNF含量的变化建模后第7日 ， 模型组TNF含量高于正常对照组（P0.05）；肺宁各剂量组、强的松组TNF含量低于模型组（P0.05） ， 也低于正常对照组（P0.05）；肺宁高剂量 。

16、组TNF含量低于强的松组（P0.05）. 第14日 ， 模型组TNF含量仍高于正常对照组（P0.05）；肺宁中、高剂量组TNF含量低于模型组（P0.05） ， 肺宁低剂量组也低于模型组但无显著差异；肺宁高剂量组TNF含量仍低于强的松组同时也低于肺宁低剂量组（P0.05 ， 表2）. 3讨论 我们在先前的实验中发现 ， 肺宁水煎液在1 g/kg剂量下连续灌胃给予肺纤维化模型大鼠28 d ， 对肺纤维化病变的病理和生化指标有较好的改善作用3. 为此我们进一步研究肺宁浸膏在肺纤维化形成早期的治疗作用. 肺泡炎是BLM 致肺纤维化损伤的早期表现 ， BLM肺纤维化模型的病理演变能较好的再现人类间质性肺纤维化病情进展的全过程 ，。

17、是目前国内外研究肺纤维化的理想模型4-5. 本实验观察到 ， 模型组肺组织形态学观察多呈23级肺泡炎表现 ， 肺宁各治疗组肺泡炎程度呈 02级肺泡炎表现 ， 炎性细胞浸润明显减轻（P0.01）. 说明肺宁可削弱炎症反应 ， 减少炎症细胞的渗出 ， 在肺纤维化形成的早期发挥作用. 有研究表明肺泡巨噬细胞脂质过氧化损伤是BLM致肺泡炎损伤的机制之一7. 实验结果显示模型组MDA含量高于正常对照组 ， SOD活性低于正常对照组（P0.05） ， 提示自由基损伤至少是肺纤维化形成机制中的一个重要环节. 肺损伤大鼠经治疗后 ， 肺宁各治疗组MDA含量低于模型组 ， SOD活力、GSH含量高于模型组（P0.05） ， 尤以肺宁高剂量组效果较好 ，。

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标题：大鼠|肺宁对大鼠博莱霉素肺损伤早期治疗作用的机制研究( 二 )