体外降解：DpnI识别序列5-GmATC-3（在DNA序列中 ， 一般每256bp中出现一次） 。
甲基化模板可被DpnI识别、切割 ， 而去甲基化的扩增产物（发生突变的产物）不会被降解,Invitrogen：GeneTailor Mutagenes 。

9、is System,优点 引物部分重叠 ， 指数扩增 扩增产物可见 ， 易于操作 筛选方法：DMT体内降解 缺点： 突变点在一条引物上 无DpnI限制性内切酶降解模板,Stratagene：QuickChange Mutagenesis System,优点： 筛选方法：DpnI限制性内切酶 缺点： 引物完全重叠 ， 线性扩增 ，扩增产物不可见 ， 可操作性差 扩增产物为线状 无DMT体内消化降解模板,TransGen:Easy/Fast Mutagenesis System,共有部分：PCR组分、DpnI酶、DMT细胞 Easy Mutagenesis System： 使用EasyPfu酶 Fast Mutagenesis System： 使用FastPfu酶 扩增速度比Taq更快、保真性比Pfu更高 ， 扩增10Kb左右的质粒只需2个小时！ （请参考金品是怎样炼成的,TransGen,引物部分重叠 ， 指数扩增 ， 扩增产物可见 ， 易于操作；扩增产物为环状； 两条引物上均有突变点 ， 突变效率高； DpnI体外降解筛选 + DMT体内降解筛选=双重筛选！ 大大提高阳性率,TransGen：Easy/Fast Mutagenesis System 引物设计示意图,谢 谢,精益求精 ， 服务科研 TransGen就在您身边 。

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标题：topo|topo克隆和点突变ppt课件( 二 )