1、生物负载测定,1,微生物的定义和分类,原核类：细菌、放线菌、支原体、蓝细胞 立克次氏体、衣原体 微生物 真核类：真菌(酵母菌、霉菌）、原生动物、 显微藻类 非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒,定义： 一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称,2,细菌细胞形态显微镜检照片,放大1000倍杆菌,放大1000倍球菌,3,微生物细胞结构示意图,细菌细胞结构图,真菌细胞结构图,4,微生物的五大共性,1、体积小 ， 面积大 巨大的营养吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的接受面 2、吸收多 ， 转化快 高速生长的物质基础 ， 活的化工厂 。
3、生产旺 ， 繁殖快 大肠埃希菌20min分裂1次 ， 48小时后的重量则达到地球的400 。

2、0倍 。
注：因营养条件的限制 ， 实际不可能发生 。
4、适应强 ， 易变异 极端环境的惊人适应能力 5、分布广 ， 种类多 空气、水体、土壤、动植物都有分布 ， 微生物有10多万种,5,微生物的存在对医疗器械的影响,活的微生物对灭菌影响 非过度灭菌的工艺因医疗器械上生物负载增加 ， 灭菌难度加大 ， 可能导致灭菌失败 。
活的微生物对使用者危害 灭菌不彻底的无菌医疗医疗器械 ， 根据使用方式的不同 ， 可能出现炎症、菌血症等病理反应 。
微生物尸体对使用者的危害 典型例子：G-菌细胞壁脂多糖成分(内毒素)通过输液进入人体血液 ， 致使人体发热,6,基本概念,生物负载的定义 一件产品和/或无菌屏障上或其中存活的微生物总数 。
对灭菌来说 。

3、：生物负载应为无菌屏障内的所有微生物 。
因为 ， 灭菌需要杀灭屏障内的所有微生物 。
对使用来说：生物负载应为产品与人体的接触面 ， 因为屏障通常不与人的自然腔道、血管、肌肉等接触 。
对生产过程控制来说：生物负载应是屏障内所有的微生物 ， 反映过程的控制水平,7,基本概念,校正因子correction factor 用于补偿无法从产品和/或微生物培养中完全采集的数值 。
培养条件 culture conditions 促进微生物复苏、生长和/或繁殖所采用的培养基和培养方式 。
回收率 recovery efficiency 用一特定技术从产品上采集和/或培养微生物能力的测定值 。
样品份额（SIP） sample。

【生物|生物负载测定】4、item portion 从某一产品单元上取出的用于试验的部分,8,产品选择的基本原则,选择和处理用于生物负载测定的产品的程序 ， 应能确保所选产品对包括包装材料和过程的常规生产具有代表性 。
若为生物负载测定的目的对产品进行分类 ， 应记录每一分类内包含这一产品的理由 。
理由应包含所选产品在是整个分类里具有代表性的标准 。
由于生物负载测定易受时间推 移的影响而改变 ， 应考虑生物 负载测定的取样时限,部分液体产品可能存在支持微生物生长的现象,9,SIP取样的基本要求,如果已验证生物负载在本产品上或内是均匀分布的 ， 则SIP可以是该产品的任何部分 。
否则 ， 样品应包含能代表所制产品的每种相应材质而随机选取的产品部 。

5、位 。
若已知生物负载分布 ， 可以从认为对灭菌工艺最有严峻挑战的产品部分选择SIP,10,生物负载的测定,11,生物负载的微生物鉴定,鉴定的意义 通过微生物的鉴定 ， 了解微生物的基本来源 ， 为日常微生物的控制提供依据；灭菌工艺的的适合性提供依据（是否存在耐受特定灭菌因子的芽孢菌的存在） 。
通常鉴定的方法 常规鉴定：染色特性；细胞形态；菌落；选择性培养的使 用；生化特性； 分子水平鉴定：DNA测序后与数据库提供遗传序列比对,12,生物负载测定方法的确认,若测定方法中包括采集产品上微生物 ， 则对该技术适当性的评价； 确定回收率,以便得到修正系数； 液体类的产品非常便捷,通常不需要回收率. 对包括培养条件和微 。

6、生物计数技术在内的微生物计数适当性的评价； 不是所有的微生物可以通过单一培养基能有效培养出来的 。
微生物鉴定技术适合性的评价,13,常规测定和数据判读,确定样品大小和取样频率 。
测定方法要规定,并形成作业指导书 根据生物负载的使用目的确定鉴定的程度,通常鉴定是否存在芽孢 生物负载数据用于确定灭菌工艺的处理程度 ， 则根据具体要求进行应满足灭菌工艺设定、验证和常规控制特定标准中规定的关于生物负载数据使用的切实可行的要求 。
规定医疗器械上或屏障内的生物负载的可接受限量 。
中国有GB15980-1995的标准 ， 但未有明确的国际标准 。

来源：(未知)

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标题：生物|生物负载测定