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最新|(最新整理)生物分离工程复习题库( 四 )


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2、在色谱操作过程中为什么要进行平衡?答:1、流速平衡:流速是柱层析操作当中的主要影响因素 , 流速的快慢直接影响着分离的效果 , 流速过快 , 混合物得不到完全的分离 , 流速过慢 , 整体分离的时间要延长,因此在分离前首先要确定留宿 。
2、液体环境:为了保持被分离物质运动的均一性 , 以及好的吸附和解析效果 , 因此要保持孔隙内部和外部液体环境的一致 , 所以进行液体环境的平衡 。
3、以羧酸吸附 。

19、蛋白质为例 , 简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理?答:1、加碱:主要是调节蛋白质到达等电点 , 是蛋白质带电量减少 , 吸附力下降从而被洗脱下来 。
2、加酸:主要是抑制羧酸的电离 , 使活性基团带电量下降,吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来.3、加盐:依照质量作用定律 , 把蛋白质洗脱下来 。
3、在离子交换色谱操作中,怎样选择离子交换树脂?答:1、对阴阳离子交换树脂的选择:正电荷选择阳离子交换树脂 , 负电荷选择阴离子交换树脂 。
2、对离子交换树脂强弱的选择:较强的酸性或碱性 , 选择选用弱酸性或弱碱性树脂.3、对离子交换树脂离子型的选择:根据分离的目的 , 弱酸或弱碱性树脂不使用H或OH型 。
4、简述盐析的原理及产生的现象?答: 。

20、当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:(1)“盐溶”现象低盐浓度下,蛋白质溶解度增大(2)“盐析”现象-高盐浓度下 , 蛋白质溶解度随之下降 , 原因如下:(a)无机离子与蛋白质表面电荷中和,形成离子对 , 部分中和了蛋白质的电性 , 使蛋白质分子之间的排斥力减弱 , 从而能够相互靠拢;(b)中性盐的亲水性大 , 使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露 , 由于疏水区的相互作用导致沉淀;5、简述吸附色谱分离技术的原理?答: 利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力,包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现分离6、在运用离子交换技术提取蛋白质时 , 为什么要使用多糖基离子交换剂?答:因为离子交换树脂孔径小 , 大分子 。

21、蛋白质难以进入 。
同时 , 树脂内部主要为疏水性 , 对亲水性的蛋白质会产生影响.而多糖基离子交换剂没有上述问题 。
7、简述过饱和溶液形成的方法?答:(1)热饱和溶液冷却(等溶剂结晶)适用于溶解度随温度升高而增加的体系;同时 , 溶解度随温度变化的幅度要适中;
(2)部分溶剂蒸发法(等温结晶法)适用于溶解度随温度降低变化不大的体系 , 或随温度升高溶解度降低的体系;(3)真空蒸发冷却法使溶剂在真空下迅速蒸发 , 并结合绝热冷却 , 是结合冷却和部分溶剂蒸发两种方法的一种结晶方法 。
(4)化学反应结晶加入反应剂产生新物质,当该新物质的溶解度超过饱和溶解度时 , 即有晶体析出;8、怎样进行离子交换树脂的预处理及转型?答:物理处理: 。

22、水洗、过筛 , 去杂,以获得粒度均匀的树脂颗粒;
化学处理:转型(氢型或钠型) 阳离子树脂 酸碱酸 阴离子树脂 碱酸碱最后以去离子水或缓冲液平衡9、何谓等电点沉析法?答:蛋白质再等电点下的溶解度最低,根据这一性质,再溶液中加入一定比例的有机溶剂 , 破坏蛋白质表面的水化层和双电层 , 降低分子间斥力,加强了蛋白质分子间的疏水相互作用 , 使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来 。
10、何谓超临界流体萃取 , 并简述其分离原理?答:超临界流体萃取是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数 , 以及类似液体的密度(溶解能力强)的特点 , 利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作.其特点是安全、无毒、产品分离简单 , 但设备投资较大 。
11、 。

23、简述结晶过程中晶体形成的条件?答:结晶过程包括过饱和溶液的形成、晶核的形成及晶体的生长三个过程,其中溶液达到过饱和状态是结晶的前提,过饱和度是结晶的推动力 。
12、简述凝胶色谱的分离原理?答:凝胶排阻色谱的分离介质(填料)具有均匀的网格结构 , 其分离原理是具有不同分子量的溶质分子 , 在流经柱床是 , 由于大分子难以进入凝胶内部,而从凝胶颗粒之间流出 , 保留时间短;而小分子溶质可以进入凝胶内部 , 由于凝胶多孔结构的阻滞作用,流经体积变大,保留时间延长.这样 , 分子量不同的溶质分子得以分离 。
13、膜分离过程中 , 有那些原因会造成膜污染 , 如何处理?答:(1)膜污染主要有两种情况:一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水 。


来源:(未知)

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