按关键词阅读: 基本技术课件 遗传学第2章 课件 技术 基本 遗传学
处理方法: 物理灭菌法:指采用加热、辐射等物理手段达到灭菌目的的方法 。
分为加热灭菌法、过滤除菌法、紫外线照射法、微波灭菌法、辐射灭菌和离心沉淀法 。
化学灭菌法:是指用化学药品 。
8、来杀灭微生物的方法 。
包括:消毒剂消毒法和化学气体灭菌法 。
,二无菌技术,遗传学第2章 基本技术,30,物理灭菌法: 1、加热灭菌法:分为干热灭菌法和湿热灭菌法 。
在同一温度下湿热灭菌的效果比干热好 , 主要是因湿热灭菌时有水分存在 , 蛋白质易变性 , 湿热的穿透力比干热大 。
,遗传学第2章 基本技术,31,(1)干热灭菌法 火焰灭菌法:系指用火焰直接烧灼以达到灭菌的目的 。
干热空气灭菌法:系指用烘箱等设备用高温干热的空气灭菌的方法 。
,遗传学第2章 基本技术,32,(2)湿热灭菌法: 利用饱和水蒸汽或沸水等杀灭微生物方法 , 包括以下几种方法: 热压灭菌法:本法系指在热压灭菌器内 , 利用高压饱和水蒸汽杀灭微生物的 。
9、方法 。
流通蒸汽灭菌法和煮沸灭菌法:系指在常压下用100的水蒸汽或用水煮沸以杀死微生物的方法 。
低温长时灭菌法 (巴氏杀菌 ,62.8/30min),遗传学第2章 基本技术,33,2、过滤除菌法 系指使药液通过除菌滤器中的适宜滤材 , 机械滤除 , 活的或死的细菌 , 得到不含细菌药液的方法 。
,遗传学第2章 基本技术,34,3、紫外线灭菌法:紫外线可使微生物核酸蛋白变性死亡 , 同时空气受紫外线辐射后 , 产生微量臭氧 , 也起灭菌作用 。
4、微波灭菌法:水可强烈吸收微波 , 使其极性分子转动 , 分子间的摩擦而生热 , 且升温迅速 , 靠热力灭菌 。
5、辐射灭菌法:是应用射线、射线 等射线灭菌的方法 。
,遗传学第2章 基本技术,35 。
10、,化学灭菌法:包括消毒剂消毒法和化学气体灭菌法 。
1、消毒剂灭菌法:消毒是指杀死病原微生物的方法 , 常用消毒剂有: 75%的乙醇等常用于表面灭菌 。
0.1-1%升汞(HgCl2); 1-5%次氯酸钠溶液;,遗传学第2章 基本技术,36,2、化学气体灭菌法: 系指用化学药品的气体或产生的蒸汽进行杀灭微生物的方法 。
(1)环氧乙 烷灭菌法; (2)高锰酸钾和甲醛混合熏蒸法(按照甲醛(40%)10毫升立方米、高锰酸钾5克立方米计算用量 。
不同情况下 , 用量有所不同 , 但比例约为2:1) 。
; (3)甲醛 丙二醇或过氧醋酸等化学药品蒸 汽熏蒸法,遗传学第2章 基本技术,37,按照灭菌对象分,培养基:高压蒸汽灭 。
11、菌或抽滤灭菌; 玻璃器皿:湿热(时间比培养基略长,之后进行干燥)和干热灭菌(在烘箱中加热至160-180度,后恒温保持40min)均可; 金属用具:使用前干热或湿热灭菌 , 使用中火焰灭菌或小型电热石英砂灭菌器灭菌; 操作环境:熏蒸(甲 醛+高锰酸钾)3-5h;
紫外线照射0.5h;
2%新洁尔 灭溶液. 外植体 :消毒剂灭菌,遗传学第2章 基本技术,38,一、接种室(无菌操作室)和培养室 接种室是进行植物材料消毒、接种和转接的场所 , 它应是无尘、空气对流较轻微的非常洁净的实验室 。
接种室的面积不必求大 。
室内应安装紫外灯并有充足的照明条件 。
天花板及四周墙壁要光洁 , 不易积染灰尘 , 地面平坦无缝 , 便于彻底清洗 。
12、消毒 。
使用平移门窗并保持密闭 , 安装有空调器以改善工作环境 , 通过空调器进行通风换气 。
在无菌室外 , 应有一小间预备室(缓冲间) , 备有工作服、帽子和拖鞋等 。
进入接种室的工作人员的衣物、鞋帽要干净 , 并特别注意头发、手和脸要很清洁 。
工作时最好戴上灭菌口罩 , 穿上专用工作服、工作帽和拖鞋等 。
,遗传学第2章 基本技术,39,接种室内的灭菌 , 一般是先用2的新洁尔灭擦洗 , 再用70乙醇喷雾 , 使空气中的灰尘下沉 , 然后用紫外灯照射约15-30min 。
一年中要定期用甲醛和高锰酸钾产生的刺激性气体薰蒸 。
另外 , 接种室内力求简洁 , 与本室工作无直接关系的物品一律不放入 , 以利保持无菌状态 。
培养室的无菌条件要求大体上类似于接种 。
13、室 , 可利用紫外灯照射和甲醛高锰酸钾熏蒸法进行灭菌 , 并尽可能减少外来菌源的干扰 。
,遗传学第2章 基本技术,40,二、超净工作台 超净工作台置于接种室内 , 是进行无菌操作的工作区 。
超净工作台一般由鼓风机、过滤器(多级)、操作台、紫外灯和照明灯等部分组成 。
来源:(未知)
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标题:遗传学第2章|遗传学第2章 基本技术课件( 二 )