,遗传学第2章 基本技术,52,对灭菌剂的要求 v 灭菌效果好：彻底、安全、高效； v 对植物材料伤害小； v 灭菌剂易消除或易分解（环境污染少） 。
,遗传学第2章 基本技术,53,四、无菌操作要点 提前15min开机 ， 使超净工作台自净 。
做好个人卫生、穿戴好工作服及口罩后 ， 在工作台上用70酒精擦拭双手和台面 ， 晾干双手 ， 小心点燃酒精灯 ， 双手尽量不要离开无菌区 。
在灯焰上灼烧接种工具（镊子和手术刀等） ， 冷却备用 。
,遗传学第2章 基本技术,54,取一瓶培养材料于灯焰上烧瓶口 ， 使灰尘固定于瓶壁并 。

20、杀死附着的微生物 。
小心打开瓶盖 ， 将瓶盖倒扣于台面上 。
用镊子取出材料 ， 在无菌纸或无菌器皿中进行切割 。
以同样的方法打开培养基的瓶盖 ， 将切割好的材料接种于培养基 ， 小心盖回瓶盖 ， 用力拧紧 。
接种完一批切割的材料后 ， 清理台面并用酒精擦拭 。
灼烧工具 ， 准备做下一瓶材料 。
为避免微生物掉落于培养瓶内 ， 操作时应将瓶拿成斜角 ， 并禁止大声讲话 。
,遗传学第2章 基本技术,55,无菌操作注意事项：,（1）进入接种室前应洗净双手 ， 穿好工作服 ， 戴好工作帽 。
（2）接种操作前用75%的酒精擦拭双手 。
（3）接种操作时要端座 ， 不要俯身工作台 ， 口鼻远离接种区（如瓶口） ， 尽量不要讲话 。
（4）打开培养瓶口（拔棉塞时和盖棉塞时 。

21、）前和盖盖之前 ， 坚持灼烧培养瓶口和盖口（或棉塞） ， 将微生物固定 ， 防止进入瓶内 。
（5）接种过程中手臂切忌从培养基、无菌材料、接种器械等物品上方经过 ， 以免引起污染 。
（6）当培养容器敞着口时 ， 应倾斜瓶口防止污染物进入培养容器 。
,遗传学第2章 基本技术,56,污染的主要来源： 1. 培养器皿； 2. 培养基本身； 3. 植物材料； 4. 接种室环境； 5. 培养室环境； 6. 操作器械； 7. 操作人员 。
,遗传学第2章 基本技术,57,细菌污染？： 受污染的培养基呈粘液状、混浊状或发酵起泡 ， 并伴有明显的酸臭气味 ， 一般在接种后35d即可表现出来 。
细菌污染以芽孢杆菌污染最为普遍和严重 ， 芽孢杆菌形成芽 。

22、孢后 ， 能够忍耐一定的高温高压、消毒剂及紫外线等灭菌处理 。
这种污染在早期不易发现 ， 一旦发现 ， 造成的污染损失可能就比较大 。
,细菌污染,真菌污染,污染,遗传学第2章 基本技术,58,真菌污染的特点是长霉 霉的颜色可有多种 ， 一般在接种后7d以上方可表现 ，长霉的部位可以是外植体 ， 也可以是培养基 。
,遗传学第2章 基本技术,59,细菌污染与真菌污染的比较,细菌污染 接种后3-4天 黏液状或发酵泡状菌斑；出现浑浊或云雾状痕迹 材料带菌；操作人员不慎；培养基灭菌不彻底,真菌污染 接种后5-10天 形成不同颜色和形状的霉层 材料带菌；超净工作台失效；接种环境,遗传学第2章 基本技术,60,一些特别重要的材料若 。

23、被污染 ， 可以取出清洗后进行更严格的灭菌 ， 重新接种培养（二次灭菌） 。
对污染培养瓶应及时、妥善地处理 ， 最好是在未打开瓶盖之前 ， 把所有的污染瓶集中进行高压灭菌 ， 清除污物后洗净备用（清理污染物） 。
,遗传学第2章 基本技术,61,使用超净工作台的注意事项, 超净工作台不应安装在尘埃太多的地方 。
在使用前应开紫外灯15-20分钟 ， 吹风10-15分钟 。
操作前应先将实验材料和操作器械、药品等物品事先放入台内 ， 不要中途拿进 。
台面上放置的东西不宜太多 ， 特别是注意不要把东西迎面堆的太高 ， 以免挡住气流 。
定期检查 ， 更换过滤器,遗传学第2章 基本技术,62,第三节外植体的类型及其选择与处理,外植体: 指用于接种培 。

24、养的各种离体的植物材料 包括胚胎材料、各种器官、组织、细胞甚至原生质体等 。
外植体是植物离体培养能否成功的决定因素之一 。
,遗传学第2章 基本技术,63,一、外植体的类型及选择依据,1、外植体的类型及其优缺点 （）茎尖 是应用最多的外植体 是最理想的起始材料之一 茎尖是植物地上部分的雏形 ， 具有顶端分生组织、叶原基和腋芽原基 ， 只需诱导生根即可成为完整植株 。
生长速度快 ， 不容易产生遗传变异 ， ,遗传学第2章 基本技术,64,另外 ，利用微茎尖进行离体培养 ， 还是获得无病毒植物的一个有效途径 对园艺植物的科研与生产都具有十分重要的意义 。
,遗传学第2章 基本技术,65,（）茎段、花茎或花梗（带节或不带节）。

来源：(未知)

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标题：遗传学第2章|遗传学第2章 基本技术课件( 四 )