按关键词阅读: 基本技术课件 遗传学第2章 课件 技术 基本 遗传学
根据风幕形成的方向 , 可分为垂直式和水平式两类 。
超净工作台的工作原理:鼓风机将空气送入由特制的微孔泡沫塑料片层叠合组成的“超级滤清器”后吹送出来 , 由于滤清器孔径的限制 , 直径大于0.3m的尘埃、细菌和真菌孢子都不能通过 , 从而形成连续不断的无菌空气流 。
优点:操作方便 , 预备时间短 , 工作效率高 。
超净空气的流速一般为每分钟2430m , 既能防止附近空气的袭扰 ,。
14、又不至于妨碍用酒精灯焰灼烧对器械 , 有利于保持材料不受污染 。
,遗传学第2章 基本技术,41,在超净台工作面的上方应安装紫外灯 , 注意勿将紫外灯装入照明灯罩(玻璃板)内 , 否则不具有杀菌作用 。
使用操作台之前应开紫外灯15min以上 , 以激发空气中的氧分子缔合成臭氧分子(O3) , 这种气体有很强的杀菌作用 , 可以使紫外线没有直接照到的角落产生灭菌效果 。
由于臭氧有碍健康 , 在进入操作之前应关掉紫外灯 , 10min后方可入内 。
,遗传学第2章 基本技术,42,三、试材和器具的灭菌 (一)培养基和水的灭菌(高压) (二)特殊药品的除菌处理 离体培养研究中 , 常常要用到一些在高温高压灭菌条件下易分解或失活的药品 , 如IAA 。
15、、GA3、酶类、维生素及抗生素等 , 必须用非高温的方法进行除菌处理 。
过滤除菌是使溶液通过孔径 0.45m的微孔滤膜 , 由于细菌和真菌的细胞都远远大于这一孔径 , 故过滤可达到去除菌类的目的 。
为使溶液能较快地通过滤膜 , 须对溶液进行抽滤或加压 。
另一种非高温除菌法 , 是用乙醚处理干燥的药品 , 在低温30下除去乙醚 , 然后溶于无菌水中 。
,遗传学第2章 基本技术,43,1、器皿(具)灭菌 刀 , 剪 , 镊等金属器材用具 , 使用前浸泡在70乙醇中 , 用时置火焰上灼烧消毒 , 冷却后使用 。
也可将拭净或烘干的金属器材用纸包好 , 盛在金属盒内 , 用电热烘箱在160下处理1小时实现灭菌 。
工作服、口罩等布制品及培养皿、漏斗、吸管等玻璃器具最 。
16、好采用用湿热消毒 。
将洗净晾干的布制品用牛皮纸包好 , 按照消毒培养基的方法消毒 。
另外 , 玻璃器皿也可置于电热烘箱内消毒 , 通常用150 40min , 或120 2h , 或直接在水中煮沸消毒 。
,遗传学第2章 基本技术,44,2、外植体的灭菌 外植体在接种之前 , 须经严格的灭菌 , 但又要注意不致于损伤外植体 。
由于灭菌药剂的种类不同 , 其杀菌力不同 , 所以 , 在使用不同的药剂时 , 需要考虑使用浓度和处理时间 , 对不同植物种类的不同外植体 , 处理也有不同 。
另外 , 外植体在进入消毒剂之前 , 应认真取材及清洗 , 尽可能减少其初始带菌量 。
下面列出主要消毒剂的使用方法 , 并对其性质进行简要介绍 。
,遗传学第2章 基本技术,45,常用消毒剂, 。
17、遗传学第2章 基本技术,46,次氯酸钠(NaClO):用市售的“安替福民”配制210的NaClO , 处理时间530min , 无菌水冲洗45次 。
由于它分解出具杀菌作用的氯气 , 灭菌处理后易于除去 , 无残留 , 既有较强的杀菌力 , 又对植物无害 , 是常用的杀菌剂 。
新洁尔灭:一种广谱的表面活性灭菌剂 。
它对绝大多数植物外植体伤害很小 , 灭菌效果很好 。
通常使用1:200稀释液处理30min或以上 。
,遗传学第2章 基本技术,47,7075酒精: 具有较强的穿透力和杀菌力 常作为表面灭菌的第一步 它具有浸润和灭菌的双重作用 但不能彻底灭菌 , 必须结合其他药剂灭菌 。
一般处理时间为530s 。
,遗传学第2章 基本技术,48,升汞 。
18、(HgCl2): 剧毒的重金属盐杀菌剂 原理:Hg2与带负电荷的蛋白质结合 , 变性失活 。
使用浓度:0.10.2 ,时间:612min 须用无菌水反复多次冲洗(5次) 。
使用中务必注意安全 。
,遗传学第2章 基本技术,49,漂白粉: 低毒有效的消毒剂 一般含1020(重量/体积)的Ca(ClO)2 使用浓度:510或饱和溶液 。
因其易吸潮分解而失效 , 应随配随用 。
,遗传学第2章 基本技术,50,过氧化氢(双氧水): 常用612的溶液处理 灭菌效果较好 容易除去 , 不会损伤外植体 通常用于叶片材料的灭菌 。
,遗传学第2章 基本技术,51,有时还需在药液中加入润湿剂 使杀菌剂湿润整个组织 如加入数滴或0.1 。
19、的吐温(Tween)80或吐温20 ,或者用磁力搅拌、超声振动等方法使杀菌剂充分接触外植体 , 以利于彻底灭菌 。
来源:(未知)
【学习资料】网址:/a/2021/0329/0021808271.html
标题:遗传学第2章|遗传学第2章 基本技术课件( 三 )