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薄层|薄层实验方法展开剂各项( 二 )



按关键词阅读: 实验 薄层 各项 展开 方法


4.层析4.1展开室4.1.1直立式双槽展开室 具有节省溶剂、便于预平衡、可控制展开箱内的湿度等优点 。
4.1.2 水平展开室 可以从薄层板的两侧向中间水平地展开 , 这样可使一块薄层板所承受的样品个数比常规上行展开的薄层板增加一倍 。
4.1.3 自动展开室(AMD) 可使用五种溶剂对同一薄层进行多次展开 , 自动控制预饱和、展开方式、展开距离和干燥条件 , 分离效率比传统方式提高三倍(可在80mm之内分离40种成分) , 符合GLP/GMP要求 。
4.2. 溶剂使用的溶剂必须是“分析纯”或“色谱纯” , 溶剂组成采用体积量比(如正丁醇 - 冰乙酸 - 水 = 4:1 。

8、:1 , V/V/V) , 或者绝对量(如18ml甲苯 + 2 ml甲醇) 。
其总量应足以使TLC/HPTLC板的浸入深度约为5mm 。
展开剂要求新鲜配制 , 不要多次反复使用,如需分层 , 则按要求放置分层后取需要的一相(上层或下层) , 备用 。
在双槽展开室中 , 对每种类型和规格和层析板 , 每槽通常注入的溶剂数量如表3 。
表3:板的规格 板的尺寸(宽高) 溶剂量预制板 2020cm2010cm1010cm 25ml15ml8ml高效板 2010cm1010cm 10ml5ml (1) 硫酸(sulphuri acid)通用显色剂 。
试液: a、5%浓硫酸乙醇或乙酐溶液 b、浓硫酸与甲醇或乙醇等体积混合 c、15%浓硫酸正 。

9、丁醇溶液 方法:用以上任一试液喷洒或浸湿晾干 , 于110摄氏度加热至呈色 , 或达最强荧光 。
(2)碘(iodine) 通用显色剂 。
试液: a:0.5%碘的氯仿溶液 。
喷后处理:待薄层上过量碘挥散 , 喷1%淀粉溶液 , 斑点转为兰色 , 如有过量碘留在薄层上 , 则背景也呈兰色 。
b:碘蒸气:将少许碘晶体放入一密闭的容器内 , 使之充满饱和碘蒸气 , 将薄层放入容器片刻或数分钟即显色 。
有时在容器内放一小杯水增加湿度 , 可提高显色的灵敏度 , 可提高显色的灵敏度 。
在化合物斑点处显黄-棕色 。
(3)磷钼酸(molybdophosphoric acid) 用于还原性化合物、类脂、甾体化合物等 。
试液:5%或10%磷钼酸乙醇溶液喷或 。

10、浸后处理:于120摄氏度加热至最佳颜色形成 , 如将薄层放入含25%氢氧化铵溶液的容器内 , 可使背景颜色消退 。
(4)香草醛-硫酸(vanillin-sulphuric acid)用于精油、高级醇、酚等 试液:香草醛1g溶于100ml硫酸或香草醛0.5g溶于100ml硫酸-乙醇(1:1)溶液 。
喷或浸后处理:于120摄氏度加热至颜色最深 。
(5)三氯化铁(ferric chloride)用于酚类、羟酰胺酸 。
试液:1%5%三氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液 。
注:酚类呈兰色或绿色 , 羟酰胺酸呈红色 。
(6)三氯化铝(aluminium chloride)用于黄酮类化合物 。
试液:1%三氯化铝乙醇溶液 ,。

11、紫外光长波下斑点显黄色荧光 。
(7)碘化铋钾试剂(dragendorff reagent)用于生物碱和某些含氮化合物 。
试液:a:次硝酸铋0.85g溶于10ml冰乙酸与40ml水中 。
b:碘化钾8g溶于20ml水中 。
方法:试液a和b等量混合 , 置棕色瓶保存试液 。
用前将试液1ml加2ml冰乙酸和10ml水混合 。
注:显色斑点呈橙红色 。
(8)茚三酮(ninhydrin)用于氨基酸、胺与氨基糖类 试液:茚三酮0.2g溶于乙醇100ml或溶于100ml正丁醇 , 加乙酸3ml 。
喷或浸后处理:于110摄氏度加热至最佳颜色出现 。
(9)邻苯二甲酸苯胺用于还原糖 。
试液:苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g 。

12、溶于100ml以水饱和的正丁醇中 。
喷或浸后处理:于105摄氏度加热10min , 醛己糖及甲基戊糖呈棕色 , 醛戊糖呈樱桃红色(10) 硫酸铈:用于生物碱 配制方法 :10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液 (11)桑色素(羟基黄酮) 通用显色剂, 有荧光活性 配制方法 :0.1% 桑色素+甲醇 (13) 二硝基苯肼(DNP) 用于醛和酮 配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇 (14)高锰酸钾 用于含还原性基团化合物 , 比如羟基 , 氨基 , 醛 配制方法 :1.5g KMnO4+ 10g K2CO3+ 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水.。

13、使用期3个月(15)溴甲酚绿 用于羧酸 , pKa=5.0 配制方法 :在100ml乙醇中 , 加入0.04g溴甲酚绿 , 缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液 , 刚好出现蓝色即至 。
(16)钼酸铈 通用显色剂 配制方法 :235mL 水 + 12g 钼酸氨 + 0.5g 钼酸铈氨 + 15mL 浓硫酸 (17)茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1 通用显色剂 配制方法 :135乙醇 + 5mL 浓硫酸 + 1.5mL of 冰醋酸 + 3.7mL 茴香醛 , 剧烈搅拌 , 使混合均匀. 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 用于萜烯 , 桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法 : 。


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