按关键词阅读: 实验 薄层 各项 展开 方法
如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开 , 则可以根据这些已知化合物的Rf值(后面介绍Rf值)对各斑点的组分进行鉴定 , 同时也可以进一步采用某些方法加以定量 。
薄 。
26、层层析有许多优点:它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点 , 同时展开速率快 , 一般仅需1520分钟;混合物易分离 , 分辨力一般比以往的纸层析高10100倍 , 它既适用于只有001g的样品分离 , 又能分离大于500mg的样品作制备用 , 而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂 。
薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想 。
(二) 固定相支持剂的选择和处理 在薄层层析时 , 对支持剂的选择主要考虑两方面:一是支持剂的性质与适用范围;二是支持剂的颗粒大小 。
一般来说 , 所选吸附剂应具有最大的比表面积和足够的吸附能力 , 它对欲分离的不同物质应有不同的吸附能力 , 即有足够的分辨力;所选吸附剂与溶剂及样品组分不会发 。
27、生化学反应 。
吸附力的强弱规律可概括如下:吸附力与两相间界面张力的降低成正比 , 某物质溶液中被吸附的程度与其在溶剂中的溶解度成反比 。
极性吸附剂易吸附极性物质 , 非极性吸附剂易吸附非极性物质 。
同族化合物的吸附程度有一定的变化方向 , 例如 , 同系物极性递减 , 而被非极性表面吸附的能力将递增 。
1支持物的性质与适用范围薄层层析的支持剂较常用的是硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素、聚酰胺及DEAE纤维素 。
(1)硅胶 硅胶是应用最广泛的一种极性吸附剂 。
它的主要优点是化学惰性 , 具有较大的吸附量 , 易制备成不同类型、孔径、表面积的多孔性硅胶 , 一般以SiO2xH2O通式表示 。
硅胶的吸附活性取决于含水量 , 吸附层析一般采用含水量为10 。
【薄层|薄层实验方法展开剂各项】28、12的硅胶 , 含水量小于1的活性最高 , 而大于20时 , 吸附活性最低 。
用加热脱水法可使硅胶活化 , 降低吸附活性的硅胶能显著改善分离性能 , 增加样品的负载量 。
硅胶适用于分离酸性和中性物质 , 碱性物质能与硅胶作用 , 因此如用中性溶剂展开 , 碱性物质有时留在原点不动 , 或者斑点拖尾 , 而不能很好地分离 。
为了使某一类化合物得到满意的分离 , 可改变硅胶酸碱性 。
例如 , 可用稀酸或稀碱液(0105molL)或一定pH值的缓冲溶液代替水制备酸性、碱性或某一pH值的薄层;也可在硅胶中加入氧化铝(碱性)制成薄层;或在展开剂中加入少量的酸或碱进行展层 。
使用硅胶和硅藻土时 , 通常要先加入粘合剂再在支持板上涂布 。
常用的粘合剂为煅石膏和淀粉 , 在硅 。
29、胶、氧化铝和硅藻土中分别加入520石膏后 , 称为硅胶G、氧化铝G和硅藻土G 。
用煅石膏为粘合剂的薄层易从玻璃板上脱落 , 但具有耐腐蚀性试剂的优点 。
加淀粉制成的薄层 , 机械性能较好 , 但不宜用腐蚀性强的试剂 。
(2)氧化铝 氧化铝为微碱性吸附剂 , 适用于亲脂性物质的分离制备 , 氧化铝具有较高的吸附容量 , 价格低廉 , 分离效果好 , 因此应用也较广泛 。
在使用氧化铝作吸附层析时 , 要注意选择适当活性及适当酸碱度的产品 。
氧化铝通常可按制备方法不同而分为碱性、中性和酸性三种 。
碱性氧化铝可应用于碳氢化合物的分离;中性氧化铝适用于醛、酮、醌、某些苷类及酸碱溶液中不稳定的酯、内酯等化合物的分离;酸性氧化铝适用于天然及合成的酸性色素以及 。
30、醛、酸的分离 。
(3)聚酰胺 聚酰胺由己二酸与己二胺聚合而成 , 也可用己内酰胺聚合而成 , 因它们都含有大量酰胺基团 , 故统称聚酰胺 。
聚酰胺薄膜层析是1966年后发展起来的一种薄层层析方法 , 用此方法分析氨基酸衍生物DNP一氨基酸、PTH一氨基酸、DNS一氨基酸及DABTH一氨基酸时 , 具有灵敏度高、分辨力强、展层迅速和操作简便等优点 。
目前由国产原料制成的聚酰胺薄膜性能良好、效果满意 , 已用于酚类、醌类、硝基化合物、氨基酸及其衍生物、核酸碱基、核苷、核苷酸、杂环化合物、合成染料;磺胺、抗菌素、环酮、杀虫剂及维生素B等16类化合物的分析 。
(4)硅藻土和纤维素 它们是中性支持剂 , 需在吸附水、缓冲溶液或甲酰胺等之后 。
31、 , 才能用于薄层层析 。
2支持剂的颗粒大小用作薄层层析固定相的支持剂颗粒 , 要求大小适当、均匀 。
稿源:(未知)
【傻大方】网址:/a/2021/0621/0022536445.html
标题:薄层|薄层实验方法展开剂各项( 五 )