按关键词阅读: 环境 实验 毒理学
2. 数据处理将不同浓度试验培养液和对照培养液的藻细胞浓度与测试时间绘制成曲线图 , 再用下面方法确定浓度效应关系 。
生长率是单位时间内(tn-t1)藻类细胞增长的量(Nn-Nt) 。
对数生长期的藻类平均特定生长率可用下式计算:(1)式中:藻类平均生长率;t培养时间 , t1为起始时间 , tn为终了时间;N藻类细胞生长量 , N1为起始细胞数 , Nn为最终细胞数 。
以不同浓度组中藻类生长率的下降比例与对数浓度作图 , 可直接从图上读出EC50 , 再标明测定时间 , 如24 h EC50 。
也可求出回归关系式 , 再算出EC50 。
表2 实验记录表格根据直线内插法或概率单位图解法估算24 h、48 h和72 h 。
8、藻类生长受到抑制的EC50 。
测得的实验数据如下:生物量单位:105个/mL根据直线内插法或概率单位图解法估算24 h、48 h和72 h藻类生长受到抑制的EC50:24h EC50=3.35 48h EC50=3.39 72h EC50=3.47七、注意事项1. 在正式试验前必须进行必要的预试验 。
2. 实验藻种的选择和预培养应注意:藻细胞大小均匀 , 颜色鲜绿 , 处于对数生长期 。
试验开始3天内 , 对照组藻细胞浓度至少应增加16倍 。
3. 需要明确受试化合物的理化特性 , 有针对性的进行实验 。
八、讨论与思考1.干扰藻类EC50正常测定的因素有哪些?(1)各锥形瓶在培养箱内的位置不同 , 受光程度不同 , 导致藻类生长 。
9、情况受影响 。
(2)在藻类培养过程中 , 部分藻类沉淀 , 影响受光(3)测定吸光度时 , 藻液未混合均匀 , 导致测得的数据与实际不符、2.受试物质对藻类的生长在不同时期起的作用有何不同?有无促进作用?随着时间增加 , 高浓度抑制作用加强 , 低浓度促进作用加强 。
3.根据实验结果 , 提示进一步开展哪方面的研究?可进行以下几个方面的研究:(1) 探究受试物影响藻类生长的具体原因;(2) 探究该受试物是否对其他植物有类似的左右;(3) 实验成果的具体应用 。
实验二 污染物对发光细菌的急性毒性测试发光菌毒性测试是 20 世纪70 年代后兴起的一种微生物监测环境污染及检测污染物毒性的新方法 。
1978 年美国 Beckman 公司 。
10、即推出功能完备的生物发光光度计“Microtox” , 自此 , 这一急性毒性测试技术在世界范围内迅速推广 。
因此人们也将发光菌毒性测试称为Microtox 测试 。
采用现代光电检测手段(生物发光光度计)的发光菌生物毒性实验是毒理学中生物测定的方法之一 。
该方法快速、简便、灵敏、廉价,在有毒物质的筛选 , 环境污染生物学评价等方面有重要的意义 , 因而备受各国有关研究者的关注 。
1995 年3 月 , 国家环境保护局、国家技术监督局将发光菌毒性测试定为水质监测标准方法(GB/T 15441-1995) 。
一、实验目的1. 掌握发光细菌毒性测试的标准方法;2. 根据发光细菌发光强度的变化判断受试化合物的毒性;3. 初步了解 。
11、发光细菌毒性测试的影响因素 。
二、实验内容1. 发光细菌的复苏;2. 发光细菌发光强度的测定;3. 受试化合物毒性的计算 。
三、实验原理发光细菌是一种非致病性的普通细菌 , 具有发光能力 , 在正常条件下经培养后能发出肉眼可见的兰绿色光 , 这种发光过程是细菌体内一种新陈代谢反应 , 是氧化呼吸链上的一个侧支 。
发光细菌的发光反应模式图(1)所示 。
发光细菌发光反应途径可简单概述为:FMNH2O2RCHO荧光FMNH2O+RCOOH (1)这个发光现象是呼吸代谢耦合 , 作为光能被散发 。
当细菌体内合成萤光酶、萤光素、长链脂肪醛时 , 在氧的参与下发生生化反应 , 反应的结果便产生光 。
发光菌的发光现象是其正常的代谢活动, 在一定条 。
12、件下发光强度是恒定的 , 与外来受试物(无机、有机毒物, 抑菌、杀菌物等) 接触后, 其发光强度即有所改变 。
变化的大小与受试物的浓度呈相关关系, 同时与该物质的毒性大小有关 。
通常认为外来受试物通过下面两个途径抑制细菌发光: (1) 直接抑制参与发光反应的酶类活性;
(2) 抑制细胞内与发光反应有关的代谢过程(如细胞呼吸等) 。
毒物的毒性可以用EC50 表示, 即发光菌发光强度降低50% 时毒物的浓度 。
实验结果显示, 毒物浓度与菌体发光强度呈线性负相关关系 。
因而可以根据发光菌发光强度判断毒物毒性大小, 用发光强度表征毒物所在环境的急性毒性 。
图 (1) 发光细菌的发光反应模式 。
稿源:(未知)
【傻大方】网址:/a/2021/0812/0023646891.html
标题:环境|环境毒理学实验( 二 )