9、00% 有机相 从尝试运行开始 - 一个平缓的梯度 您必须确定: 有机溶剂 初始组成 梯度时间 梯度陡度 梯度形状 流速 柱长 柱重新平衡时间 010203040min. 100% B 100% B 0% B 0% B tG = 40 tG = 20 100% B 100% B 0% B 0% B tG = 10 tG = 5 010 陡陡 平缓平缓 %B time 线性 步进 凹形 凸形 线性梯度 线性梯度 线性梯度 选凹形梯度曲线选凹形梯度曲线 用步进梯度或流速梯度用步进梯度或流速梯度 选凸形梯度曲线选凸形梯度曲线 10分钟的梯度 ， 6分钟的平衡时间色谱图不重复 平衡时间6分钟 平衡时间7分 。

10、钟 平衡时间8分钟 平衡时间9分钟 平衡时间从6到7分钟 ， 第一个峰的保留时间有明显的 变化 ， 说明6到7分钟的平衡时间不足 ， 而8到9分钟变化 不大因而大于这个时间时 ， 平衡充足 。
02468101214 Time (min) 5%/min 1 ml/min - 5%/ml 5%/min 2.5 ml/min - 2%/ml 0 1 1 0 1 0 0 01 02 03 04 05 0 % O r g k 0102030 time (min) 迁移距离 10 cm 开始 25 cm 保留时间 (min) 柱长化合物 A 化合物 B 10 cm14.215.3 25 cm 18.2 17.9 k 和有机改性剂百分含量之间的关系和有机改性剂百分含量之间的关系 - 等梯度条件等梯度条件 (n.b. k为对数坐标为对数坐标) 梯度洗脱过程中的迁移梯度洗脱过程中的迁移 Ghost Peaks 0% MeOH 100% 对于下列应用 ， 梯度洗脱可能不适合对于下列应用 ， 梯度洗脱可能不适合: 使用强保留添加剂的应用. 离子对色谱应用 在裸硅胶柱上的正相HPLC Blank run producing ghost peaks due to impure water. 在允许的时间内获得最大分离: 分析时间短 - 短柱 ， 高流速 分析时间长 - 长柱 ， 正常流速 80 结束语结束语。

稿源：(未知)

【傻大方】网址：/a/2021/0822/0023897169.html

标题：高效|高效液相色谱实验步骤和方法开发完整版( 二 )