13、污水难以充分混合 ， 出现分层现象时 ， 可按各层水量 的比例分层取样 。
6.1.6 气溶胶样本：样品采集应符合 HJ/T 167、HJ/T 194 的规定 。
采样点的设置应符合 HJ/T 167、 HJ 664 的规定 。
采样前应根据采样任务和计划确定采样器类型、配件、辅助器材及其相应数量 。
根据不同类型空气采样器具体要求进行样本采集 。
采样器一般固定于支架上或置于平稳的表面上 ， 采样高度应根据具体情境和需求进行调整 ， 一般情况下采样器进气口距离地面高度建议为 1.2 m1.5 m 。
调整采样器流量至设定范围并记录采样开始时间 ， 确保采样器运行正常且气密性良好 。
采样过程中应避免采样器周围有人为因素的气流干扰 。
采样时间 。

14、应根据实际环境中病毒的浓度水平进行调整 。
一般情况下病毒气溶胶的采样时间建议为 15 min30 min 。
采样结束时 ， 应记录采样结束时间、采样器流量、实时温度、气压和采样点等信息 。
6.2 监测频次与采样要求6.2.1 监测频次：对重点大型农贸（集贸）市场的重点摊位按照 1 次/12 周的频次进行监测 ， 对其余需要监测的市场按照 1 次/月的频次进行监测 ， 不同风险等级地区可根据当地疫情防控需求和市场情况进行监测频次的安排 。
6.2.2 采样实施：现场采样由至少两名工作人员参与完成 ， 采样人员防护应选择隔离衣、医用防护口罩、防护眼罩/防护面屏、鞋套/工作鞋、乳胶手套/丁腈手套 ， 必要时穿医用防护服 。
采样过程 。

15、宜开启现场采样视频记录设备 。
6.2.3 采样装备：生物样本转运箱、商品化病毒采样管和采样拭子、水样富集器、气溶胶采集器、样本采集信息登记表、洁净采样袋、冰袋和生物安全垃圾袋等 。
6.2.4 采样操作：采样开始前 ， 使用手消毒设备进行手部消毒 。
拭子样本采样过程中 ， 采样拭子只能接触当前采集的物体 ， 避免触碰到其他物体 。
采样结束后 ， 按照生物安全要求脱去防护服等个人防护装 备 ， 清理废弃物后离场 。
6.2.5 采样记录：样本信息应包括样本采集的时间、地点、农贸（集贸）市场名称、摊位号、采样类型、样本编号以及采样人员等信息 ， 对于采样面积较大的样本 ， 可单独标注物表面积 。
新型冠状病毒环 境监测样本采集信息登记表参见附 。

16、录 A 。
6.2.6 样品转运：采集样品和样本采集信息登记表应在 24 h 内转运至当地指定的新型冠状病毒检测机构进行检测 ， 样本宜冷藏（0 10 ）存放于专用的生物样本转运箱中 ， 并由专人、专车进行转运 。
7 实验室检测7.1 样本处理7.1.1 污水水样前期处理：参考 WHO 的方法 ， 使用离心技术去除污水中杂质 。
先打开低温离心机 ， 待温度降至 4 左右 ， 建议 4654 g 离心力离心 30 min ， 取全部上清 。
再使用膜吸附技术或超滤技术（超滤管分子量 10 kDa100 kDa）进行上清液的浓缩 ， 浓缩后可获得 0.5 mL2 mL 体积的浓缩液 。
7.1.2 样本分装：样本应在生物安全二级实验室（BS 。

17、L-2）的生物安全柜内分装 ， 个人防护装备采用生物安全三级实验室防护的要求 。
所有采集的环境样本应分装到带有内螺旋盖的冻存管内 ， 按照 200 L 1000 L/管进行分装 。
样本保存容器及分装管外注明样本编号、种类及采样日期 ， 用于后续核酸提取和/或病毒分离等实验室检测工作 。
7.1.3 样本保存：用于核酸检测的样本应尽快进行检测 ， 24 h 内可以完成检测的样本可置于 4 保存；24 h 内无法检测的样本则应置于-70 冰箱保存（如无-70 保存条件 ， 则于-20 冰箱保存） 。
7.2 核酸提取7.2.1 宜采用荧光定量 RT-PCR 诊断试剂盒说明书上建议的配套的提取试剂 。
7.2.2 应在 BSL-2 实 。

18、验室内 ， 使用核酸提取试剂盒进行病毒核酸的提取 。
核酸提取后 ， 应将核酸产物进行封盖分装 ， 用于后续检测 。
7.3 核酸检测7.3.1 在 BSL-2 实验室中 ， 采用经国家药品监督管理局批准的荧光定量 RT-PCR 诊断试剂进行新型冠状病毒核酸检测 。
7.3.2 RT-PCR 反应体系和操作参考相关厂家试剂盒说明 。
每一次 RT-PCR 反应均应设置阴性对照、阳性对照和无模板空白对照 ， 以确保扩增体系工作正常 。
7.4 结果判断按照新型冠状病毒肺炎防控方案 ， 对商品化核酸检测试剂盒进行检测后结果判读时 ， 以厂家提 供的说明书为准 。
7.5 阳性结果复核核酸检测阳性结果复核验证和相应防控措施 ， 由当地疫情防控部门按照国家 。

来源：(未知)

【学习资料】网址：/a/2021/0319/0021725937.html

标题：WST|WST 776-2021 农贸（集贸）市场新型冠状病毒环境监测技术规范( 三 )