）（二）倾注培养 操作方法：（1）根据标准要求或对污染情况的估计 ， 选择23个适宜稀释度 ， 分别在制10倍递增稀释的同时 ， 以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中 ， 每个稀释度做两个平皿 。
（2）将凉至46左右沙氏琼脂培养基注入平皿约15ml ， 并转动平皿 ， 混合均匀 。
同时将沙氏琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照 。
（3）待琼脂凝固后 ， 翻转平板 ， 置281温箱内培养5天 ， 取出计算平板内菌落数目 ， 乘以稀释倍数 ， 即得每克（每毫升）样品所含菌落总数 。
（为 。

32、了防止样品颗粒与菌落混淆不清 ， 可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC） ， 培养后菌落呈红色 ， 易于分别 。
）（三）计数操作方法：培养到时间后 ， 计数每个平板上的菌落数 。
可用肉眼观察 ， 必要时用放大镜检查 ， 以防遗漏 。
在记下各平板的菌落总数后 ， 求出同稀释度的各平板平均菌落数 ， 计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数 ， 进行报告 。
（到达规定培养时间 ， 应立即计数 。
如果不能立即计数 ， 应将平板放置于04 ， 但不得超过24h 。
） 注：计数方法与细菌菌落的计数一致 。
8 结果报告婴氏（福建）纸业有限公司YINGSHI（FUJIAN）PAPER CO.,LTD.纸尿裤中大肠菌群的测定编制：许金钗审核：YSQ检测方法15 。

33、批准：大肠菌群的测定1 目的为了更好地统一公司的检测方法 ， 确保公司质量控制和产品检测的准确性 。
2 职责品管部负责检测方法的收集、编写、审核 ， 确保产品和环境卫生 。
确实做好产品检测的准确性 ， 并做问题反馈3 适用范围本本方法适于大肠杆菌的检测 。
4 仪器与试剂10ml2525试管 ， 1ml 1515试管 ， 9cm平皿 ， 10ml移液管 ， 1ml移液管 ， 0.9生理盐水 ， 250ml三角瓶 ， 温箱：361 ， 恒温水浴：44.50.5 ， 天平 ， 显微镜 ， 均质器 ， 载玻片 ， 酒精灯 ， 试管架 ， 乳糖胆盐发酵管 ， 伊红美蓝琼脂平板 ， 乳糖发酵管 ， EC肉汤 ， 磷酸盐缓冲稀释液 ， 生理盐水 ， 革兰氏染色液5 定义大肠菌群：大肠菌群系指一群能发酵乳糖、 。

34、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌 。
该菌主要来源于人畜粪便 ， 故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量 ， 推断样品中有否污染肠道致病菌的可能 。
6操作步骤6.1检样稀释6.1.1以无菌操作将检样25mL(或g)放于含有225mL灭菌生理盐水的灭菌均质器 ， 以8 00010000r/min的速度处理1min ， 做成110的均匀稀释液 。
6.1.2用1mL灭菌移液管吸取110稀释液1mL ， 注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内 ， 振摇试管混匀 ， 做成1100的稀释液 。
6.1.3另取1mL灭菌吸管 ， 按上条操作依次做10倍递增稀释液 ， 每递增稀释一次 ， 换用1支1mL灭菌吸管 。
6.1.4根据卫生标准要求或对检样 。

35、污染情况的估计 ， 选择三个稀释度 ， 每个稀释度接种3管 。
6.2乳糖发酵试验将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内 ， 接种量在1mL以上者 ， 用双料乳糖胆盐发酵管 ， 1mL及1mL以下者 ， 用单料乳糖胆盐发酵管 。
每一稀释度接种3管 ， 置361温箱内 ， 培养242h ， 如所有乳糖胆盐发酵管都不产气 ， 则可报告为大肠菌群阴性 ， 如有产气者 ， 则按下列程序进行 。
6.3分离培养将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上 ， 置361温箱内 ， 培养1824h ， 然后取出 ， 观察菌落形态 ， 并做革兰氏染色和证实试验 。
6.4证实试验在上述平板上 ， 挑取可疑大肠菌群菌落12个进行革兰氏染色 ， 同时接种乳糖发酵管 ， 置361温箱内培养242h ， 观察产气情况 。
凡 。

36、乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌 ， 即可报告为大肠菌群阳性 。
6.5报告根据证实为大肠菌群阳性的管数 ， 查MPN检索表 ， 报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值 。
7 粪大肠菌群(faecal coliform)7.1用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物,转种于EC肉汤管内 ， 置44.50.2水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面) ， 培养242h ， 经培养后 ， 如所有EC肉汤管均不产气 ， 则可报告为阴性；如有产气者 ， 则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上 ， 置361培养1824h ， 凡平板上有典型菌落者 ， 则证实为粪大肠菌群阳性 。
7.2结果报告根据证实为粪大肠菌群的阳性管数 ， 查MPN检 。

37、索表 ， 报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值 。

稿源：(未知)

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标题：纸尿裤|纸尿裤行业质量检验手册( 六 )