10、ignal FISH:Fusion-signal FISH:Translocation-positiveTranslocation-negativeFalse-positiveFalse-negativeMicroscope:Sample/nucleus:Slide:13 ALK FISH interpretaion criteria: 15% split signals, at least 50 tumor cells were analyzed, if the result is equivocal, additional 50 tumor cells should be counted. 。

11、 Positive cells: separated green and orange signals or single red signals identified cells with rearranged ALK;
Negative cells: overlapping of orange and green signals (yellowish) indicated cells in which ALK was not rearranged.Martelli MP, Sozzi G, Hernandez L, et al. EML4-ALK rearrangement in non- 。

12、small cell lung cancer and non-tumor lung tissues. Am J Pathol. 2009 Feb;
174(2):661-70Shaw AT, Yeap BY, Mino-Kenudson M, et al. Clinical features and outcome of patients with non-small-cell lung cancer who harborEML4-ALK. J Clin Oncol 2009;
27:424753.The assay should be only on 10% neutral buffered F 。

13、FPE human lung tumor tissue. Other types of specimens or fixatives should not be used. 14Cancer, 2012Crizotinib 临床疗效与临床疗效与ALK+ 无关无关:-ALK+% 分离率并非疗效就更好分离率并非疗效就更好- ALK+%分离率低并非疗效不好分离率低并非疗效不好15Sun, Jong-Mu, et al.Journal of Thoracic Oncology. 7(12):e36-e3816NSCLC 活检组织标本活检组织标本EGFR突变检测突变检测腺癌（粘液性或实性 ， 腺癌（粘液性或 。

14、实性 ， signet cell？）？）阴性或阴性或unknown据组织类型选择合适技术新鲜标本石蜡标本Ventana IHC手动手动IHC检测检测* ？阳性阳性阴性阴性FISHRT-PCR多重多重PCR或或RACE*: 对于部分无条件行Ventana IHC检测的中心 ， 手动ALK IHC可作为替代的筛选方法: 如果是细胞学样本 ， 推荐使用RT-PCR检测 虚线：建议在富集人群（粘液性腺癌、含印戒细胞成分、不吸烟、年龄60岁）中进行筛选3+/2+/1+ALK融合基因阳性非小细胞肺癌融合基因阳性非小细胞肺癌17在 ALK融合阴性的患者 ， 免疫组化显示无ALK表达 。
FISH：进行Vysis LSI ALK 。

15、双色打散FISH探针检测到ALK融合（分裂的红色和绿色信号） 。
http:/dx.doi.org/10.1155/2013/757490 对 AmoyDx EML4-ALK融合基因检测 ， 实时RT-PCR显示delta Rn对PCR循环数的变化 。
在 ALK融合阳性的患者 ， 免疫组化显示ALK表达 。
18CharacteristicsEML4-ALKMutation, N (%)Wild type, N (%)PAge, years 60 609 (3.6)19 (7.9)240 (96.4)220 (92.1)0.040Sex Male Female9 (3.1)19 (9.8)286 (96.9) 。

16、174 (90.2)0.002Stage IA IB IIA IIB IIIA IIIB IV 12 (9.0)4 (2.9)2 (33.3)1 (2.3)9 (5.5)00122 (91.0)132 (97.1)4 (66.7)42 (97.7)156 (94.5)130.036bHistopathology AD SCC AD-SCCe Others25 (7.2)2 (2.0)1 ( 5.6)0324 (92.8)99 (98.0)17 (94.4)200.053dDifferentiation Poor Good Unidentified8 (6.3)17 (5.0)3 (12.5)1 。

17、19 (93.7)320 (95.0)21 (87.5)0.594Smoking status No Yes Unknown21 (8.2)4 (2.6)3 (4.0)236 (91.8)152 (97.4)72 (96.0)0.021fProbaility of disease-free survival1.00.80.60.40.20.06.018.012.024.0Time(months)Logrank,P=0.006 ALK positive ALK negativeJ. X. Zhou ， et al. Annals of Oncology 00: 17, 2012 doi:10.109 。

18、3/annonc/mds62619 EML4-ALK变异体的多种引物 ， 变异体的多种引物 ， GAPDH作为对照作为对照 GLCI内部数据：所有内部数据：所有12个个ALK融合阳性样品均通过多融合阳性样品均通过多路路RT-PCR测序技术得以证实 。
测序技术得以证实 。
20Takeuchi et al. Multiplex Reverse Transcription-PCR Screening for EML4-ALK Fusion Transcripts. Clin Cancer Res 2008;
14(20): 6618Zhang et al. Molecular cancer 2010融合序列捕获融 。

19、合序列捕获的确定性的确定性21XC Zhang ， YL Wu et al. 2012 ESMO ， 22NSCLC 活检组织标本活检组织标本EGFR突变检测突变检测腺癌（粘液性或实性 ， 腺癌（粘液性或实性 ， signet cell？）？）阴性或阴性或unknown据组织类型选择合适技术新鲜标本石蜡标本Ventana IHC手动手动IHC检测检测* ？阳性阳性阴性阴性FISHRT-PCR多重多重PCR或或RACE*: 对于部分无条件行Ventana IHC检测的中心 ， 手动ALK IHC可作为替代的筛选方法: 如果是细胞学样本 ， 推荐使用RT-PCR检测 虚线：建议在富集人群（粘液性腺癌、含印戒细胞成分、不吸 。

20、烟、年龄5%的肿瘤细胞呈现颗的肿瘤细胞呈现颗粒状细胞质强着色；粒状细胞质强着色；IHC 2+：5%的肿瘤细胞呈现中度细胞的肿瘤细胞呈现中度细胞质着色；质着色；IHC 1+：5%的肿瘤细胞呈现微弱或模糊的细胞质的肿瘤细胞呈现微弱或模糊的细胞质着色或着色或5%的肿瘤细胞有任何程度的着色；的肿瘤细胞有任何程度的着色；IHC 0：肿瘤细胞：肿瘤细胞无着色 。
无着色 。
”E Thunissen, et al. Virchows Arch(2012)461:245-25731Yoshiko Murakami, et al. Frontiers in Oncology .2012;

稿源：(未知)

【傻大方】网址：/a/2021/0905/0024106572.html

标题：中国|中国ALK阳性NSCLC诊断专家共识V14( 二 )