-15- 灌装体积与数量 灌装体积 每只容器的灌装体积不少于总容积的1/3 同样 ， 灌装体积也不宜过大 既要考虑到瓶倒转或旋转时 ， 培养基能充分接触到容器 和密封件的内表面 ， 又要保证容器内有足够的氧气支持 微生物生长 。
灌封数量 综合考虑统计学要求和实际生产批量 。
FDA (5000瓶)：如果正常生产的批次 。

9、量低于5000瓶 ，则培养基灌封至少应为实际生产线的最大批次量 。
PIC (3000瓶)：如果正常生产的批次量低于3000瓶 ， 则 培养基灌封至少应为实际生产线的最大批次量 。
-16- 灌封时间与批次量控制 灌装时间 对于初始性验证 ， 培养基灌封实验应安排在一周内的不同 时间进行 。
对于再验证 ， 可选择在一周结束或其它最差条件下进行 。
灌封时间要涵盖实际生产班次 。
批次量控制 初次验证 ， 至少要连续成功灌封3个批次 。
再验证至少需要成功灌封1个批次 。
-17- 培养基灌封实验的合格标准 FDA指南（2004版）与EU GMP 附件1标准统一 1.灌封量10000瓶时 ， 若有1瓶污染 ， 需彻底调查； 若有两 。

10、瓶污染 ， 必须进行彻底调查 ， 并重新验证 （3批） 。
注：欧盟标准将自注：欧盟标准将自2009年年3月起执行 。
月起执行 。
-18- 培养基灌封实验的合格标准 2009年3月以前欧盟通用标准：污染率低于0.1% 计算公式：实际污染率 = (95%置信限值)/(灌封容器数) 100% 污染瓶数与95%置信限值间的关系 污染 瓶数 012345678910 95% 置信 限值 34.746.37.759.1510.51 11.8413.1514.4315.7116.96 -19- 培养基灌封实验的合格标准 SFDA 化学药品注射剂基本技术要求（试行） 培养基灌装试验的批量与判断合格的标准 批量（瓶）30 。

【无菌|无菌工艺验证--培养基灌封试验】11、00475063007760 允许污染的数量（瓶）0 1 2 3 -20- 不同剂型的特殊要求 -21- 冻干制剂对培养基灌封的要求 冻干制剂的典型生产流程 配制灌装冻干加塞轧盖 第一种方式 ， 模拟装载/卸载过程 ， 缩短放置时间（首选） 容器内灌封好培养基 ， 以半压塞状态装入冻干机 冻干机内部分抽真空（500mbar） ， 在室温放置一定的时间 ，不得冷冻 。
用无菌空气破真空（不使用惰性气体） ， 全压塞 轧盖 注意 ， 若所使用的容器透明度不高 ， 应将内容物倒出进行检查 。
冻干制剂培养基灌封试验的特殊性 对产品在冻干机内放置步骤的模拟 -22- 冻干制剂对培养基灌封的要求 第二种方式 ， 模拟冻干时间 半压塞产品在 。

12、冻干机腔室内的放置时间同于正常工艺 。
缺点：耗时长 第三种方式 ， 以经稀释的培养基模拟冻干过程 容器内灌封好经稀释的培养基（diluted medium） ， 以半压 塞状态装入冻干机 模拟冻干过程 ， 直到容器内的培养基大致达到正常浓度 （full strength）为止 。
缺点：耗时长 ， 需开发特殊的冻干程序 ， 营养支持性不均 一 ， 影响微生物的存活力 。
-23- 粉针剂对培养基灌封的要求 第一种方法 在灌装线上直接灌装液体培养基 ， 灌装后压塞-轧盖或 熔封 。
第二种方法 先灌装干粉培养基 ， 再加入注射用水 第三种方法 先灌装惰性剂 ， 再加入液体培养基 要点 采用第二、三种方法时 ， 所用惰性剂或干粉培养基需 事先 。

13、经过辐射灭菌 。
常用惰性剂有聚乙二醇8000、羧甲基纤维素、乳糖 。
-24- 混悬剂/半固体制剂对培养基灌封的要求 悬浮剂 需要模拟搅拌或循环流动的过程 。
如果有无菌添加过程 ， 也应进行模拟 。
半固体制剂 需要将液体培养基增稠到适当粘度 。
可选用琼脂或羧甲基纤维素作为增稠剂 ， 也可选用其 它试剂 ， 但要证明其没有抑制细菌或真菌的作用 。
在培养结束后 ， 需将培养基从塑料或金属管中挤出检 查其混浊度和真菌菌落 ， 也可进行无菌检查实验 。
如果选择显色培养基遇到污染物变色的方法 ， 则需要 对其进行验证 。
-25- 方案 与 报告 -26- 制订培养基灌封实验方案的考虑因素（一） 生产线最长运行时间及其造成的相关风 。

14、险 干预的次数、类型和复杂程度 是否有冻干工序 设备的无菌装配 总人数和所从事的操作 无菌加入和无菌转移的次数 班次更换、暂停和必要的更衣 无菌设备的拆卸与连接 环境监测 -27- 制订培养基灌封实验方案的考虑因素（二） 生产线的配置和运行速度 产品重量检查 容器/密封系统 与无菌操作相关的各种特殊规定 总人数和所从事的操作 n总的原则 n综合考虑生产线可能造成污染的各种因素 n尽可能模拟实际生产的无菌操作 n可能时 ， 应包括最差条件的模拟测试 -28- 验证开始前的准备工作 设备确认 通风系统（HVAC）的确认 设备的在线清洗和灭菌CIP,SIP 灭（除）菌工艺验证 湿热、干热灭菌工艺 除菌过 。

稿源：(未知)

【傻大方】网址：/a/2021/0801/0023374547.html

标题：无菌|无菌工艺验证--培养基灌封试验( 二 )