15、滤 空气过滤器的完好性检测 容器/胶塞密封完好性测试 人员培训 洁净室环境达到设计要求 -29- 培养基灌封实验方案的内容举例 定义被模拟的工艺 定义使用的房间 ， 灌封线和 设备 使用的容器和密封件的类型 灌装线的速度 灌封数量 模拟过程中的干扰和中断的 数目和类型 参与的人员数目 使用的培养基 灌封到容器内培养基的体积 选择的最差条件及其原理 培养条件 ， 培养温度 ， 培养 时间 所进行的环境监测 批记录复印件 职责说明 所有工作的合格标准 列举最终报告中需要的文件 本次模拟的持续时间 -30- 方案的执行与记录（一） 培养基灌封的日期和时间 使用的房间和设备 容器胶塞的型号和尺寸 培养基种类和灭菌 。

16、方式 每容器中的灌装体积 灌装速度 灌封的瓶数 ， 灯检丢弃的瓶数和原因 培养的瓶数 ， 阳性的数量 培养时间和温度 -31- 方案的执行与记录（二） 环境监测的数据 参与培养基灌封的人员 培养基灵敏度检查的结果 有无阳性结果 。
如有 ， 要给出 微生物鉴定的结果 。
如发生异常情况 ， 需给出调查 报告 。
-32- 培养基灌封实验中的环境监测 环境监测按照相应的规程进行 ， 包括： 空气粒子数 沉降碟 浮游菌 表面监测 人员监测 n对无菌生产区环境的评估 -33- 培养基灌封实验中的灵敏度检查实验 n培养基灵敏度检查实验： 使用完成14天培养的灌封前期培养基样品 n用枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠球菌、铜绿 。

17、假 单胞菌、黑曲霉和环境菌作为阳性菌 n将每个菌种准备含100cfu/0.1ml的菌液 ， 每个菌种接种2支 培养基样品 ， 同时并平板计数（双份） n对真菌在20-25C下培养 ， 对细菌在30-35 C下培养 ， 每天 检查 ， 5天内需有生长迹象 -34- 再验证与增补性验证的要求 再验证 对每条生产线 ， 每年进行两次再验证 ， 间隔时间为5-7个 月。
人员至少每年参加一次再验证 ， 以进行资格再确认 。
每条生产线轮流使用最大和最小规格的容器 ， 变换生产线 的速度 。
增补性验证 根据风险程度决定培养基灌封实验的批数 。
通常为1-3批 。
-35- 培养基灌封实验的总结报告 最终报告中应包括以下内容 模拟的最差条件 事件 。

18、清单 环境监测结果 微生物鉴别结果 培养基的营养检查实验结果 培养条件、结果读取日、结果读取人、每位参与者的灌装瓶 数等信息 。
结论（结果是否可以接受） 合格证书 工艺验证/再验证合格证书 人员资格确认证书 -36- 难点讨论 -37- 培养基灌封实验阳性结果的调查 (一) n调查的范围应包括 环境微生物监测数据 ， 空气悬浮粒子监测数据 CIP设备 ， 清洁、消毒程序的执行情况 培养基、设备和零件的灭菌工艺 ， 灭菌釜的校正情况 高效过滤器检测 (空气悬浮粒子水平 ， 过滤器检漏 ，风速测量 ， 密封系统检查 ， 使用年限等) 除菌过滤器完好性 房间气流型式与压差 人员操作技术培训情况 -38- 培养基灌封实验阳性 。

19、结果的调查 (二) n调查的范围还应包括 以往产品无菌检查实验结果 人员卫生状况监测数据 培养基灌装实验中的干预方式分析 该区域近期是否有过维修活动 ， 生产线的改造情况 该生产线培养基灌封实验历史数据 已灭菌物品的储存条件 培养基灌封过程中的异常事件 阳性污染菌与环境监测污染菌的鉴别 -39- 培养基灌封实验阳性结果的调查 (三) 调查结论与风险评估 培养基灌封实验结果有效 暂停生产 ， 直至确定污染来源并采取有效的纠偏措施 。
再验证合格后 ， 产品方可放行 。
对培养基灌封实验后和此前所生产的产品 ， 进行风险评估 培养基灌封实验结果无效重新进行培养基灌封实验 条件1无菌灌装区的物理条件不满足要求 条件2人 。

20、员未按照正常生产程序操作 -40- 培养基灌封后的生产 n培养基灌封后可以进行生产 ， 但要等培养基灌封合 格后产品才能放行（产品有报废的风险） 。
n无效的培养基灌封后可以进行生产 ， 但所生产的批 次要在成功培养基灌封后方可放行 。
n培养基灌封失败 生产线不能用来生产 ， 根据调查结果决定培养基灌 封的次数和数量 ， 培养基灌封合格后 ， 才能生产 。
-41- 讨论：最差条件 Worst Case 最差条件最差条件 高于或低于正常范围的条件限度 ， 与正常生产条 件相比最有可能造成工艺或生产失败的条件 。
注意注意 如果某些做法会带来污染的风险 ， 则不允许用培 养基灌封的结果为它的不合理的进行辩护 -42- 最差条件的 。

稿源：(未知)

【傻大方】网址：/a/2021/0801/0023374547.html

标题：无菌|无菌工艺验证--培养基灌封试验( 三 )