1、无菌工艺验证 培养基灌封试验 主讲人：崔强 2008年3月 E-mail: -2- 为什么需要 进行培养基灌封试验 ？ -3- 来自生产工艺的要求 对产品进行最终灭菌 ， 是降低微生物污染风险的常用办法 。
但 有大量药品不适用于最终灭菌而只能采用无菌生产工艺方法 。
无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一 ， 确保产品无菌是 该工艺最大的难点 。
减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施 人员培训 无菌工艺验证 -4- 最终灭菌工艺与无菌生产工艺的差异 最终灭菌工艺 在高洁净净环境下进行灌装和密封 通常 ， 产品、容器和密封件的微生 物污染水平很低 在密封容器中进行最终灭菌 无菌生产工艺 产品、容器和密封件分别进 。

2、行灭菌 ，然后进行灌封 在极高洁净环境下进行灌装和密封 产品在最终容器中不再做进一步的 灭菌处理 对各个组成部分的灭菌工艺需要进 行严格验证和监控 在灌封前和灌封过程中的操作会带 来污染风险 空瓶 灭菌 隧道 密封件 蒸汽灭菌釜 除菌 过滤 人员 半压 塞瓶 冻干机 全压 塞瓶 -5- 来自FDA和USP的要求 FDA CGMP 无菌工艺药品指南（2004年版） An aseptic processing operation should be validated using a microbiological growth medium in place of the product. Th 。

3、is process simulation, also known as a media fill. USP 31 洁净室和其它控制环境的微生物学评价 To assure that minimal bioburden is achieved, additional information on the evaluation of the microbiological status of the controlled environment can be obtained by the use of media fills. An acceptable media fill shows tha 。

4、t a successful simulated product run can be conducted on the manufacturing line at that point in time. -6- 来自EU GMP和国内的要求 EU GMP 附件1 无菌药品的生产（2008年2月新版） Validation of aseptic processing should include a process simulation test using a nutrient medium (media fill). 中国药品生产质量管理规范附录（1998年修订） SFDA 化学药品注射剂 。

5、基本技术要求（试行） 培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验 证,是判断无菌保证水平的关键手段 采用无菌生产工艺的粉针剂 ， 应能保证SAL不大于10-3 -7- 无菌工艺产品的无菌保证 无菌工艺产品 PersonnelEnvironment 工艺验证 人员 原料 环境 无菌检验 -8- 作业环节与风险 作业环节验证难易度人员依赖程度相关风险 灭菌易低低 房间设计N/AN/A中等 环境监测中等可变高 消毒难高高 更衣难很高很高 物品转移难高高 无菌技术（灌封）难很高很高 无菌装配难很高很高 -9- 培养基灌封实验的 常规要求 -10- 定义与目的 目的 证明生产线采用无菌工艺生产无菌 。

6、产品的能力 对人员进行资格确认 符合cGMP的要求 使用培养基模拟药品进行无菌灌封 ， 对无菌工艺进行 验证 。
又称为“工艺模拟试验”. -11- 工艺模拟试验的通常流程 将培养基暴露于设备、容器胶塞密封系统的表面和关键环 境条件中 ， 并模拟实际生产完成工艺操作 。
对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长 。
评价结果 ， 确定实际生产中（如灌装前的调试、加入无菌 原辅材料、无菌连接、灌装和密封）产品污染的可能性 。
-12- 培养基灌封试验的时机 初始验证与再验证 初始验证 需要重复多次 ， 以确保结果的一致性和有效性 。
有差异的多次实验结果工艺过程失控的象征 定期再验证 定期进行 ， 评估无菌工艺的受控情 。

7、况 。
应综合考虑每一班次及班次变化过程中有代表性的活 动及干预 。
对人员的资格再确认应纳入到定期再验证中 。
-13- 培养基灌封试验的时机 增补性培养基灌封试验 变更及其评估 对产品或生产线的每一种变更 ， 均应根据书面 的变更控制系统进行评估。
如果通过评估认为此项变更会影响到无菌生产 工艺产品的无菌保证水平 ， 则需要进行增补性 培养基灌封实验 。
比如 ， 设施或设备的变化、生产线配置的变动、 人员重要变动、环境监控结果异常、容器-胶塞 系统变更、停车时间延长、无菌检查结果阳性 等 。
-14- 实验用培养基和培养温度的选择 选择时的注意事项 适应广谱微生物生长 ， 包括细菌和真菌 较好的澄明度 ， 较小的粘 。

8、度 易于除菌过滤 常用培养基：3大豆胰蛋白肉汤（TSB） 厌氧培养基仅在特殊情况下使用 培养温度 FDA - 20-35 ， 目标值2.5 ， 不少于14天；如选择两 个温度 ， 则每一温度下至少培养7天 ， 从低温开始 。
PIC - 20-25下至少14天 ， 或 ， 先20-25下7天 ，然后 30-35下7天 。

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标题：无菌|无菌工艺验证--培养基灌封试验