傻大方摘要：【实验|实验6+DNA酶切、连接及电泳检测( 五 )|DNA|酶切|连接|电泳|检测】29、较多用7.8 ， 目的是提供合适酸碱度的连接体系 ， 目的是提供合适酸碱度的连接体系 ；10mmol/L的的MgCl2 ， 作用是激活酶反应； ， 作用是激活酶反应；...
按关键词阅读： 实验 检测 连接 DNA 电泳 酶切
29、较多用7.8 ， 目的是提供合适酸碱度的连接体系 ， 目的是提供合适酸碱度的连接体系 ；10mmol/L的的MgCl2 ， 作用是激活酶反应； ， 作用是激活酶反应；1-20mmol/L 的的DTT ， 较多用 ， 较多用10mmol/L ， 作用是维持还原性环境 ， 稳 ， 作用是维持还原性环境 ， 稳 定酶活性 ， 定酶活性 ， 25-50ug/ml的的BSA ， 作用是增加蛋白质的浓 ， 作用是增加蛋白质的浓 度 ， 防止因蛋白浓度过稀而造成酶的失活 。
度 ， 防止因蛋白浓度过稀而造成酶的失活 。
l 与限制酶缓冲液不同的是连接酶缓冲液还含有与限制酶缓冲液不同的是连接酶缓冲液还含有0.5- 4mmol/L的的ATP ， 现多用 ， 现多用1mmol/L ， 是酶反应 。
30、所必需的 。
， 是酶反应所必需的 。
实实 验验 报报 告告 按规范的实验报告格式完成本节内容的实验按规范的实验报告格式完成本节内容的实验 报告 ， 要求记录电泳图谱 ， 说明带型含义并与报告 ， 要求记录电泳图谱 ， 说明带型含义并与 对照相比较 。
如未能得到预期结果 ， 请分析失对照相比较 。
如未能得到预期结果 ， 请分析失 败原因 。
败原因 。
思考题思考题 1.1. 用提取的一种质粒作电泳分析 ， 可能会出现一条或二条用提取的一种质粒作电泳分析 ， 可能会出现一条或二条 或三条带型 ， 该如何判断它们的构型？或三条带型 ， 该如何判断它们的构型？ 2.2. 影响限制性内切酶活性的因素有哪些？影响限制性内切酶活性的因素有哪些？ 3.3. DNADNA完全酶切所具备的条件？完全酶切所具备的条件？ 4.4. 如果一种如果一种DNADNA酶切液在电泳后发现酶切液在电泳后发现DNADNA未被切动 ， 你认为未被切动 ， 你认为 是什么原因？是什么原因？ l 下次实验：大肠杆菌感受态细胞的制备与转化下次实验：大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 。
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标题：实验|实验6+DNA酶切、连接及电泳检测( 五 )